基于无膜式器官芯片构建肝纤维化模型的方法技术

本发明专利技术涉及一种基于无膜式器官芯片构建肝纤维化模型的方法，包括：培养肝类器官、肝星状细胞、库普弗细胞；基于所培养的细胞采用自重力驱动的无膜芯片构建肝类器官的共培养模型；基于不同诱导条件对所述共培养模型进行纤维化诱导，获得肝纤维化模型；所述自重力驱动模式的无膜芯片包括依次设置的三个通道，相邻通道间设有导向结构，且无膜阻挡。本发明专利技术基于三通道无膜芯片构建肝脏类器官与肝星状细胞和KCs细胞共培养体系，采用内毒素和不饱和脂肪酸刺激的方式，通过不同时间条件模拟肝炎到脂肪肝再到肝纤维化的表型。与单独培养肝类器官模型相比，本发明专利技术的共培养肝纤维化模型具有更敏感的刺激反应性以及更真实的肝炎‑肝纤维化表型。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及体外肝脏纤维化模型构建，尤其是一种基于无膜式器官芯片构建肝纤维化模型的方法。

技术介绍

1、肝脏是人体最大的消化腺，负责合成、代谢、分解、解毒等500多种功能。它主要由肝细胞和非实质细胞组成，如肝窦内皮细胞(lsecs)、肝星状细胞(hepatic stellatecell，hsc)和kupffer细胞(kcs)，它们通过直接或间接的细胞串扰事件共同调节肝功能。肝纤维化(liver fibrosis)是多种病因导致的慢性肝脏疾病。其主要特征是肝脏内弥漫性的、过量的细胞外基质沉积，尤其是胶原。研究表明，如果能给予有效的病因治疗，或能直接抑制细胞外基质的合成或促进其降解，已经形成的肝纤维化甚至是可以逆转的，但是当病变继续进展产生肝硬化(cirrhosis)及肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma)时，肝脏结构和功能会发生不可逆损害，威胁患者生命。

2、由于缺乏足够的体外模型来复制肝脏纤维化存在的病理进程和生化刺激，相关机制研究以及新药药效评价因此受到一定程度的阻碍。关于体外肝纤维化模型，有研究证实体外多能干细胞分本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于无膜式器官芯片构建肝纤维化模型的方法，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的基于无膜式器官芯片构建肝纤维化模型的方法，其特征在于，步骤S23中，采用垂直加样方式向每个通道注液，注液的体积为1.5～2.5μL；

3.根据权利要求1所述的基于无膜式器官芯片构建肝纤维化模型的方法，其特征在于，步骤S25中，将无膜芯片水平放置在摇摆灌注仪上，无膜芯片水平放置时，B通道处于中间，其余两通道位于B通道的上下两侧，摇摆过程中使A、C通道内液体相互冲击，摇摆角度设置为3°～7°/h。

4.根据权利要求1所述的基于无膜式器官芯片构建肝纤维化模型的方法，...

【技术特征摘要】

1.一种基于无膜式器官芯片构建肝纤维化模型的方法，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的基于无膜式器官芯片构建肝纤维化模型的方法，其特征在于，步骤s23中，采用垂直加样方式向每个通道注液，注液的体积为1.5～2.5μl；

3.根据权利要求1所述的基于无膜式器官芯片构建肝纤维化模型的方法，其特征在于，步骤s25中，将无膜芯片水平放置在摇摆灌注仪上，无膜芯片水平放置时，b通道处于中间，其余两通道位于b通道的上下两侧，摇摆过程中使a、c通道内液体相互冲击，摇摆角度设置为3°～7°/h。

4.根据权利要求1所述的基于无膜式器官芯片构建肝纤维化模型的方法，其特征在于，步骤s22中，采用垂直加样方式向b通道注入所述基质胶，注入体积为1.5～2.5μl；

5.根据权利要求1所述的基于...

【专利技术属性】
技术研发人员：顾忠泽，于文龙，徐婷婷，
申请(专利权)人：江苏运动健康研究院，
类型：发明
国别省市：