一种基于外泌体mRNA的前列腺癌早期诊断标志物及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种诊断标志物，尤其涉及一种基于外泌体mRNA的前列腺癌早期诊断标志物及其应用。通过磁珠偶联OR51E2﹑STEAP2抗体捕获前列腺癌特异性外泌体，通过检测外泌体中mRNA基因CK19、基因AGR2SV‑H、基因PCA3，达到前列腺癌早诊的目的；该检测灵敏度可达到92.5％，特异性80.3％，可避免80.3％的真阴性活检，减少了过度诊疗；无痛免穿刺的诊断方式减轻了很多病人的痛苦，并节约了非必要穿刺的费用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种诊断标志物，尤其涉及一种基于外泌体mrna的前列腺癌早期诊断标志物及其应用。

技术介绍

1、前列腺癌(prostate cancer，pca)是一种严重威胁男性健康的恶性肿瘤，居全球男性恶性肿瘤发病率第2位。

2、目前，前列腺穿刺活检是确诊前列腺癌的金标准，但活检为有创检查，会引起血尿、感染、败血症等一系列后遗症。影像学检查可发现较大的肿瘤，对于微小病灶的诊断能力有限，且无法做出明确诊断。直肠指检可发现前列腺结节，但对于移行区的肿瘤，指检难以发现。前列腺特异性抗原(prostate specific antigen,psa)是前列腺癌诊断的通用标志物，用于筛查已有多年。但是psa灵敏度不足，约有15％的患者psa仍处于正常水平。特异性差，会造成过度诊疗，比如，当psa处于灰区(4-10ng/ml)时，活检阳性率只有10-25％。

3、psa早期筛查普及对降低前列腺癌死亡率非常重要。但是公认的psa正常和异常的临界值为4.0ng/ml，这一数值检测前列腺癌的特异性仅为40％左右。据估算，约有75％的psa异常者接受了本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种前列腺癌特异性外泌体的制备方法，其特征在于按以下步骤进行：

2.根据权利要求1所述的一种前列腺癌特异性外泌体的制备方法，其特征在于：所述磁珠为链霉素亲和修饰的磁珠，磁珠直径为1-3μm，磁珠为双抗体偶联免疫磁珠；所述OR51E2和STEAP2抗体为生物素标记的OR51E2和STEAP2抗体。

3.一种前列腺癌外泌体中的靶标mRNA CK19、AGR2 SV-H和PCA3以及内参基因SPDEF的制备方法，该制备方法使用权利要求1-2中任意一项所述的前列腺癌特异性外泌体，其特征在于，包括以下步骤：

4.根据权利要求3所述的一种前列腺癌外泌体中的靶标...

【技术特征摘要】

1.一种前列腺癌特异性外泌体的制备方法，其特征在于按以下步骤进行：

2.根据权利要求1所述的一种前列腺癌特异性外泌体的制备方法，其特征在于：所述磁珠为链霉素亲和修饰的磁珠，磁珠直径为1-3μm，磁珠为双抗体偶联免疫磁珠；所述or51e2和steap2抗体为生物素标记的or51e2和steap2抗体。

3.一种前列腺癌外泌体中的靶标mrna ck19、agr2 sv-h和pca3以及内参基因spdef的制备方法，该制备方法使用权利要求1-2中任意一项所述的前列腺癌特异性外泌体，其特征在于，包括以下步骤：

4.根据权利要求3所述的一种前列腺癌外泌体中的靶标mrna ck19、agr2sv-h和pca3以及内参基因spdef的制备方法，其特征在于：所述实时荧光定量pcr的扩增引物为：

5.根据权利要求3所...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐江磊，金春钰，蒋青霞，梁颖，
申请(专利权)人：杭州昱鼎生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：