【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及动物模型构建，尤其涉及ptgds基因表达体系及其应用和一种急性ad病理动物模型构建方法。
技术介绍
1、阿尔茨海默病(ad)是痴呆症中最常见的一种类型，ad基本的病理表现为以弥漫性斑块形式存在于细胞外的β样淀粉样蛋白(aβ)，和在神经元内聚集的由过度磷酸化的tau蛋白形成的神经原纤维缠。我国目前有938万ad患者。因其具体发病机制不明，故尚无公认有效的治疗手段，且ad从发病初期到死亡的时间仅为5-12年。ad发病不仅严重影响到患者的生存质量，同时也对患者家属和公共卫生体系造成极大的负担。当前我们对于ad的具体发病机制并不清楚，许多关于ad发病机制的假说也揭示了该疾病的复杂性。如毒性β-淀粉样蛋白积累，tau蛋白过度磷酸化，突触功能障碍，胆碱能缺乏，氧化应激，神经炎症，脂代谢紊乱，还包括血脑屏障通透性的改变等都在一些研究中被指出是ad发病的关键性因素。由于直接对病人进行实验往往受到实验材料及伦理方面的限制，所以制作能够很好模拟ad病理的疾病动物模型，对研究ad病理的发生和发展乃至进行药物的筛选和开发具有重要的意义。
2、小鼠因其易于繁殖和进行遗传操作，且饲养成本相对较低的特点，是最常用的模式动物，因此在近二十多年，已建立了205种以上啮齿类动物模型用来研究ad的致病机理和开发治疗药物。例如，现有技术利用小鼠建立了tg2567(app)，jnpl3(tau p301l)等单转基因，双转基因appps1，5×fad(app，ps1)等和三转基因3×tg(app/ps1/mapt)模型以及基因敲除trem2，b
3、但是现有技术中，单转基因鼠模型通常无法同时模拟ad的两种典型病理特征，即aβ病理和tau病理，而多转基因鼠，例如3×tg的模型鼠，虽然同时具备了ad的两种典型病理特征，但典型的aβ病理通常出现在6个月以后，而典型的tau病理则在12个月以后才会出现。更重要的是这些常见的转基因鼠的繁育的经济成本非常高，饲养困难，容易死亡，研究者很难短期内获得足量的研究材料。
4、中国专利cn110679549a公开了一种阿尔茨海默病小鼠模型的构建方法，采用基因型fvb-fgf14tg(teto-mapt*p301l)4510kha/jlwsj雌性小鼠，于小鼠4月龄时脑注射截短tau蛋白或者表达截短tau蛋白的载体后饲养2-4个月。该专利技术成功构建了阿尔茨海默病小鼠模型，构建的小鼠模型只有海马区出现tau病理，其他脑区未见tau病理，总构建周期为6个月。
5、但是上述现有技术仍不能有效提升急性ad病理动物模型构建的效率。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供ptgds基因表达体系及其应用和一种急性ad病理动物模型构建方法，本专利技术中的ptgds基因表达体系可用于急性造模，在野生型小鼠脑注射后一个月内脑中就会出现ad的两种典型病理。
2、为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
3、本专利技术提供了一种表达盒，所述表达盒包含启动子和ptgds基因，所述ptgds基因的表达由所述启动子驱动。
4、本专利技术所述的ptgds基因源自人l-pgds蛋白的编码基因。
5、优选的，所述ptgds基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。
6、优选的，所述启动子为hubc启动子。
7、本专利技术还提供了一种重组表达载体，所述重组表达载体中含有上述表达盒。
8、本专利技术还提供了一种重组微生物，其特征在于，所述重组微生物中含有上述表达盒或上述重组表达载体。
9、优选的，所述重组微生物采用病毒作为载体；
10、优选的，所述病毒为腺相关病毒aav。
11、本专利技术还提供了上述表达盒、重组表达载体或重组微生物在构建急性ad病理动物模型中的应用；
12、优选的，所述动物为小鼠。
13、本专利技术还提供了一种急性ad病理动物模型构建方法，包括以下步骤：
14、将上述重组微生物注射至动物大脑海马区，得到急性ad病理动物模型。
15、优选的，所述注射采用脑立体定位注射；
16、所述重组微生物的注射剂量为0.5～1.5μl/位点；
17、所述重组微生物的滴度在1010vg/ml以上。
18、在本专利技术中，对所述滴度单位vg/ml(vector genomes per ml)进行如下解释：单位体积中病毒载体的基因组数量，常用于腺相关病毒载体的滴度测定，属于物理单位。
19、优选的，所述动物为啮齿动物或灵长目动物；
20、优选的，所述啮齿动物为小鼠；
21、优选的，所述灵长目动物为猴。
22、本专利技术的有益效果：
23、本专利技术选用ptgds基因作为目的基因，构建得到了一种表达盒，所述表达盒能够用于构建重组表达载体，进一步用于构建急性ad病理动物模型中，可以成功过表达ptgds基因，实现后续功能，为ad病理机制研究提供了新接口，为开发治疗ad相关药物的研究提供了新材料。
24、利用本专利技术提供的急性ad病理动物模型构建方法，注射1月后即可发现同时增加aβ和tau蛋白，模拟两种典型ad病理特征，与现有技术相比，显著减少了模型构建中对于两种病理发生的等待时间；并且本专利技术构建方案操作简单、可行性高，降低了动物模型的获得难度，在实际应用中具有快速便捷、可重复性高的优点。
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1.一种表达盒，其特征在于，所述表达盒包含启动子和PTGDS基因，所述PTGDS基因的表达由所述启动子驱动。
2.根据权利要求1所述的表达盒，其特征在于，所述PTGDS基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示。
3.根据权利要求1或2所述的表达盒，其特征在于，所述启动子为hUBC启动子。
4.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体中含有权利要求1～3任一项所述的表达盒。
5.一种重组微生物，其特征在于，所述重组微生物中含有权利要求1～3任一项所述的表达盒或权利要求4所述的重组表达载体。
6.根据权利要求5所述的重组微生物，其特征在于，所述重组微生物采用病毒作为载体；
7.权利要求1～3任一项所述的表达盒、权利要求4所述的重组表达载体或权利要求5～6任一项所述的重组微生物在构建急性AD病理动物模型中的应用；
8.一种急性AD病理动物模型构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
9.根据权利要求8所述的急性AD病理动物模型构建方法，其特征在于，所述注射采用脑立体定位注射；
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