高免疫原性的重组蛋白、病毒样颗粒及其制备方法与应用技术

本发明专利技术属于生物医药技术领域，具体涉及一种高免疫原性的重组蛋白、病毒样颗粒及其制备方法与应用。该重组蛋白由T1‑B‑T2、linker、蜂毒信号肽、linker、PEDV S蛋白、linker、CTB、WPRE依次连接而成，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明专利技术以G II型PEDV S基因为基础，添加几种可以提高蛋白表达量和增强免疫效果的元件，得到重组蛋白TSCW；并进一步构建重组杆状病毒表达载体BV‑TSCW，最后将BV‑TSCW与BV‑M共感染获得病毒样颗粒VLP‑TSCW。该VLP‑TCSW可以诱导更高的抗体水平。本发明专利技术为为后续PEDV疫苗的优化、设计和研发奠定了基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药，具体涉及一种高免疫原性的重组蛋白、病毒样颗粒及其制备方法与应用。

技术介绍

1、猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea，ped)是以呕吐、腹泻、脱水以及体重减轻为主要特征的一种高度传染性肠道疾病，严重威胁着全球的养猪业。而猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus，pedv)是引起猪流行性腹泻的主要病原体，可感染所有年龄段猪，并对新生仔猪有极高的致死率，给养猪业带来巨大经济损失。pedv主要有g i和g ii 2个亚型，早期流行的pedv毒株是以g i为主，但是自2010年以后pedv的流行毒株逐渐变为以g ii型为主，g ii型pedv也成为目前新型疫苗研究的主要对象。pedv属于冠状病毒科甲型冠状病毒属，其基因组为单股正链rna，主要有4个结构蛋白，即刺突蛋白(spike protein，s)、包膜蛋白(envelope protein，e)、膜蛋白(membrane protein，m)以及核衣壳蛋白(nucleocapsid protein，n)。s蛋白具有受体本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种高免疫原性的重组蛋白，其特征在于，所述重组蛋白包括PEDV S蛋白、T1-B-T2、linker、蜂毒信号肽、CTB和WPRE；所述PEDV S蛋白包含如SEQ ID NO.7所示的核苷酸序列，所述T1包含如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列，所述B包含如SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列，所述T2包含如SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列，所述linker包含如SEQ ID NO.5所示的核苷酸序列，所述蜂毒信号肽包含如SEQ ID NO.6所示的核苷酸序列，所述CTB包含如SEQID NO.8所示的核苷酸序列，所述WPRE如SEQ ID NO.9所示包含的核苷酸序列...

【技术特征摘要】

1.一种高免疫原性的重组蛋白，其特征在于，所述重组蛋白包括pedv s蛋白、t1-b-t2、linker、蜂毒信号肽、ctb和wpre；所述pedv s蛋白包含如seq id no.7所示的核苷酸序列，所述t1包含如seq id no.2所示的核苷酸序列，所述b包含如seq id no.3所示的核苷酸序列，所述t2包含如seq id no.4所示的核苷酸序列，所述linker包含如seq id no.5所示的核苷酸序列，所述蜂毒信号肽包含如seq id no.6所示的核苷酸序列，所述ctb包含如seqid no.8所示的核苷酸序列，所述wpre如seq id no.9所示包含的核苷酸序列。

2.根据权利要求1所述的重组蛋白，其特征在于，所述重组蛋白的核苷酸序列如seq idno.1所示。

3.一种高免疫原性的pedv蛋白组合，其特征在于，所述pedv蛋白组合包含权利要求1所述的重组蛋白和pedv m蛋白；所述pedv m蛋白包含如seq id no.10所示的核苷酸序列。

4.含有权利要求1-2任一项所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：李德龙，余远迪，杨柳，罗杰，许国洋，付利芝，周建方，张代文，
申请(专利权)人：生猪技术创新中心重庆，
类型：发明
国别省市：