一种嗜黏蛋白艾克曼菌胞外囊泡的制备方法技术

本发明专利技术提供了一种嗜黏蛋白艾克曼菌胞外囊泡的制备方法，涉及生物技术领域。本发明专利技术的制备方法包括以下步骤：将嗜黏蛋白艾克曼菌的培养液离心10分钟，获得培养上清；用0.22μm细菌滤器过滤培养上清，获得滤液；将滤液与聚乙二醇工作液混合均匀，得到混合液，其中聚乙二醇工作液溶剂为双蒸水，溶质为聚乙二醇和NaCl；混合液摇床孵育后，离心弃去上清，得到嗜黏蛋白艾克曼菌的胞外囊泡，本发明专利技术提供的制备方法可以大批量、低成本提取嗜黏蛋白艾克曼菌胞外囊泡。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，涉及一种胞外囊泡制备方法，具体涉及一种嗜黏蛋白艾克曼菌胞外囊泡的制备方法。

技术介绍

1、嗜黏蛋白艾克曼菌(akkermansia muciniphila，akk)是定植在健康人体肠道黏膜层的革兰氏阴性厌氧菌，自2004年首次分离至今，人们已经发现akk对肥胖、高血糖、肿瘤治疗、结肠炎等都有改善作用；此外，有学者发现抗pd-1免疫治疗有效的肝癌患者中，akk丰度要比治疗无效的患者高。这些都提示akk可能与肝癌的进展相关。然而，由于菌群移植可能发生感染等不良反应，直接应用活菌治疗存在潜在风险[1]。

2、胞外囊泡(extracellular vesicles，evs)是从细胞膜上脱落或者分泌的双层膜结构的囊泡状小体。革兰阴性菌的胞外囊泡即外膜囊泡(outer membrane vesicles,omvs)是典型的直径为10-300nm的球形结构，起源于细菌外膜，囊泡内成分包含dna、rna、胞质成分、周质成分等，囊泡膜成分为外膜、周质、肽聚糖、细胞膜、脂质a、lps、孔蛋白、膜蛋白等，具有物质运输、免疫调节、转录调节等功能。<本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种嗜黏蛋白艾克曼菌胞外囊泡的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述离心条件为3000-4000rpm，离心8-12分钟。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述离心条件为4000rpm，离心10分钟。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述细菌过滤器的过滤精度为0.22μm。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述滤液与聚乙二醇工作液体积比为1:1。

6.根据权利要求1所述的制备方法...

【技术特征摘要】

1.一种嗜黏蛋白艾克曼菌胞外囊泡的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述离心条件为3000-4000rpm，离心8-12分钟。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述离心条件为4000rpm，离心10分钟。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述细菌过滤器的过滤精度为0.22μm。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述滤液与聚乙二醇工作液体积比为1:1。

6.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈烨，杨荟平，
申请(专利权)人：南方医科大学深圳医院，
类型：发明
国别省市：