多重核酸的检测系统及其应用技术方案

技术编号:42556871 阅读:39 留言:0更新日期:2024-08-29 00:28
本发明专利技术公开了一种多重核酸的检测系统及其应用,所述系统包括Target探针和公共信标探针;所述Target探针依次包括:探针引物区、Tag酶外切位点和Target区;所述探针引物区的5'端修饰有荧光淬灭基团1;所述探针引物区的3'端连接有荧光报告基团;所述Target区的5'端修饰有荧光淬灭基团2;所述公共信标探针通过C3Spacer分隔成10~20个引物结合区。利用本发明专利技术的多重核酸检测系统可有效消除非特异背景峰,同时消除了在多通道靶标存在情况下可能出现的假阳性峰,从而降低结果的假阳性误判率,实现更准确地、高灵敏地、高特异性地检出靶标序列。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于核酸检测,特别是涉及一种多重核酸的检测系统及其在制备呼吸道疾病诊断试剂盒中的应用。


技术介绍

1、在核酸检测领域存在包括探针分子杂交、核酸-蛋白互作和测序技术等多种检测技术路线。其中基于对靶序列扩增原理的聚合酶链式反应(polymerasechainreaction,pcr)是应用最广泛的技术平台。通过快速产生(扩增)数百万至数十亿份特定dna片段,然后对其更进一步的研究。pcr的历史可追溯到酝酿着人类基因组计划的1980年代中期,它是人类基因组计划早期的一项基础技术。时至今日,pcr已演化发展出一系列应用方法并发挥着重要作用,成为许多生物学和医学研究中无可替代的工具。

2、1992年,higuchi提出实时荧光定量pcr技术。通过检测溴化乙锭的含量来实时监控整个pcr反应的进程。1996年后荧光标记的水解探针被正式报道应用于pcr。在每个pcr循环的延伸结束后采集荧光信号,通过对pcr反应的数学函数关系(将到达指数扩增期所需的循环数与模板的初始浓度)、相应的算法以及对标准品的运用,对待测样品中的目标基因进行准确定量。

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【技术保护点】

1.一种多重核酸的检测系统,其特征在于,所述系统包括探针组合,该探针组合包括Target探针和公共信标探针;

2.根据权利要求1所述的多重核酸的检测系统,其特征在于,所述Target探针的Target区的序列与目标核酸序列反向互补。

3.根据权利要求1所述的多重核酸的检测系统,其特征在于,所述公共信标探针的3'端区由5~8个碱基组成,其末端是4个连续的G碱基。

4.根据权利要求1所述的多重核酸的检测系统,其特征在于,所述公共信标探针的每个所述引物结合区的长度和序列各不相同;和/或,每个所述引物结合区的长度为15~35个碱基。

5.根据权利要...

【技术特征摘要】

1.一种多重核酸的检测系统,其特征在于,所述系统包括探针组合,该探针组合包括target探针和公共信标探针;

2.根据权利要求1所述的多重核酸的检测系统,其特征在于,所述target探针的target区的序列与目标核酸序列反向互补。

3.根据权利要求1所述的多重核酸的检测系统,其特征在于,所述公共信标探针的3'端区由5~8个碱基组成,其末端是4个连续的g碱基。

4.根据权利要求1所述的多重核酸的检测系统,其特征在于,所述公共信标探针的每个所述引物结合区的长度和序列各不相同;和/或,每个所述引物结合区的长度为15~35个碱基。

5.根据权利要求1所述的多重核酸的检测系统,其特征在于,所述荧光报告基团、荧光淬灭基团1和荧光淬灭基团2均选自fam、tet、joe、hex、cy3、tamra、rox、texas、red、lcred640、cy5、lc red705、alexafluor 488和alexafluor 750;和/或,所述荧光淬灭基团1和荧光淬灭基团2相同或不同。...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘云啸张维杰李英镇李楚明王维世陈嘉昌柳俊胡朝晖
申请(专利权)人:广州市金圻睿生物科技有限责任公司
类型:发明
国别省市:

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