分子信标荧光定量PCR检测非洲猪瘟病毒方法技术

本发明专利技术属于生物医药领域，具体涉及一种分子信标荧光定量PCR检测非洲猪瘟病毒方法。本发明专利技术根据非洲猪瘟病毒(ASFV)的B646L基因的保守特异性区域，设计了特异性的引物和分子信标探针，结合实时荧光定量PCR的方法进行非洲猪瘟病毒B646L基因的检测。该方法特异性强、重复性好、灵敏度高，临床样品检测与国家标准qPCR检测方法结果一致，显示最低检出量为2.945×10<supgt;0</supgt;copies·μL<supgt;‑1</supgt;，为非洲猪瘟病毒检测增添了一种假阳性率低且快速有效的方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药领域，具体涉及一种分子信标荧光定量pcr检测非洲猪瘟病毒方法。

技术介绍

1、非洲猪瘟(african swine fever,asf)是由非洲猪瘟病毒(african swine fevervirus,asfv)引起的一种传播速度快、致死性强、传播程度高的针对家猪和野猪的传染病，急性临床表现为高热、致死率可高达100％；全身特征病变为多器官出血、淋巴结肿胀、脾脏肿大发黑。此病被世界动物卫生组织(woah)列为法定报告的动物疫病，我国将其列为一类动物疫病。2018年8月我国首次在辽宁省沈阳市报道asf病例，疫情持续至今仍未能有效的清除。

2、asfv是非洲猪瘟病毒科非洲猪瘟属的唯一成员，也是目前已知的唯一虫媒大型dna囊膜病毒。该病毒基因组大小约170-190kb，含有160-175个开放阅读框(orfs)。由于asfv的复杂结构、对外界环境强大的抵抗力和免疫逃避机制，使得国内外防控asf变得相当困难。截止目前尚未推出安全有效的商品化疫苗和防治药物。因此高效、灵敏的检测方法对于临床生产中对该病的防控十分关键。目前常用的检测本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于检测非洲猪瘟病毒的引物，其特征在于，所述的引物包括上游引物、下游引物；所述上游引物包括如SEQ ID NO.1所示的序列，下游引物包括如SEQ ID NO.2所示的序列。

2.一种用于检测非洲猪瘟病毒的分子信标探针，其特征在于，所述分子信标探针包括如SEQ ID NO.3所示的探针序列，所述探针序列的5’端和3’端标记有荧光基团。

3.如权利要求2所述的分子信标探针，其特征在于，所述探针序列的5’端标记有FAM荧光基团。

4.如权利要求3所述的分子信标探针，其特征在于，所述探针序列的3’端标记有Dabcyl荧光基团。p>

5.一种用...

【技术特征摘要】

1.一种用于检测非洲猪瘟病毒的引物，其特征在于，所述的引物包括上游引物、下游引物；所述上游引物包括如seq id no.1所示的序列，下游引物包括如seq id no.2所示的序列。

2.一种用于检测非洲猪瘟病毒的分子信标探针，其特征在于，所述分子信标探针包括如seq id no.3所示的探针序列，所述探针序列的5’端和3’端标记有荧光基团。

3.如权利要求2所述的分子信标探针，其特征在于，所述探针序列的5’端标记有fam荧光基团。

4.如权利要求3所述的分子信标探针，其特征在于，所述探针序列的3’端标记有dabcyl荧光基团。

5.一种用于检测非洲猪瘟病毒的组合物，其特征在于，所述的组合物包括上游引物、下游引物、分子信标探针；其中，所述上游引物包括如...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨吉飞，牛庆丽，钟健豪，田占成，关贵全，殷宏，
申请(专利权)人：中国农业科学院兰州兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心，
类型：发明
国别省市：