利用SadA蛋白在沙门氏菌中表面呈现表达外源抗原的方法与应用技术

技术编号:42491901 阅读:32 留言:0更新日期:2024-08-21 13:09
本发明专利技术公开了利用SadA蛋白在沙门氏菌中表面呈现表达外源抗原的方法与应用。本发明专利技术公开的方法包括将目的蛋白的编码基因插入至SadA蛋白或其截短体的编码基因中得到重组基因,将重组基因与SadB蛋白的编码基因导入沙门氏菌中,并使各基因得到表达,实现目的蛋白在沙门氏菌表面的表达。利用本发明专利技术的SadA蛋白或其截短体与SadB蛋白,在减毒鼠伤寒沙门氏菌呈现表达幽门螺杆菌尿素酶B核心区域片段,获得的重组菌免疫小鼠后能够激发其产生针对尿素酶B的特异性的IgG和sIgA,具有良好的免疫原性。说明,SadA蛋白或其截短体与SadB蛋白可作为一种新的抗原表面表达系统,用于减毒活载体疫苗的研究。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医学领域中,利用sada蛋白在沙门氏菌中表面呈现表达外源抗原的方法与应用。


技术介绍

1、细菌细胞表面展示技术是将目标生物分子,如肽或蛋白质在细菌表面进行展示。该技术已被研究和开发用于多种应用,包括肽库筛选和全细胞生物催化剂,特别是用于提高免疫有效性的疫苗递送。表面展示疫苗可以通过促进免疫系统对外来抗原的识别来增加它们的免疫原性。例如,在沙门氏菌上展示来自结核分枝杆菌的抗原,与细胞质递送相比,能引起更强的免疫反应。表面显示疫苗还具有使用便利和制造成本低等优点。表面展示系统中常用的策略是将蛋白质或肽与锚定基序融合,这对于异种蛋白在细菌表面表达的稳定性很重要。

2、三聚体自转运黏附素(taas)是v型分泌系统c亚型(t5css)蛋白,是由致病性革兰氏阴性菌分泌的一种生长中的表面粘附素。它们参与了感染过程的几个方面,包括黏附、生物膜形成和免疫逃逸。考虑到taas在疾病发病机制中的重要作用,taas已被开发为重组亚单位疫苗的候选物。taas由三个相同的多肽链组成,具有共同的n端-头-颈-茎-膜锚-c端结构。三聚体纤维的长度差异很大,从本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.生物细胞表面表达目的蛋白的方法,包括:将目的蛋白的编码基因插入至SadA蛋白的编码基因中得到重组基因,将所述重组基因与SadB蛋白的编码基因导入生物细胞中得到重组生物细胞,使所述重组生物细胞表达所述目的蛋白与SadA蛋白形成的融合蛋白以及SadB蛋白,实现目的蛋白在所述生物细胞表面的表达;

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述SadA蛋白的N端的编码基因为如下a11)或a12)或a13):

3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:B1)所述SadA蛋白的C端为长度为170、291、585、818、1193或1405个氨基酸残基的蛋白质。

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【技术特征摘要】

1.生物细胞表面表达目的蛋白的方法,包括:将目的蛋白的编码基因插入至sada蛋白的编码基因中得到重组基因,将所述重组基因与sadb蛋白的编码基因导入生物细胞中得到重组生物细胞,使所述重组生物细胞表达所述目的蛋白与sada蛋白形成的融合蛋白以及sadb蛋白,实现目的蛋白在所述生物细胞表面的表达;

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述sada蛋白的n端的编码基因为如下a11)或a12)或a13):

3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:b1)所述sada蛋白的c端为长度为170、291、585、818、1193或1405个氨基酸残基的蛋白质。

4.根据权利要求1-3中任一所述的方法,其特征在于:所述sada蛋白的c端的编码基因为seq id no.1的第3946-4455位、第3583-4455位、第2701-4455位、第2002-4...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘纯杰桑姝丽王艳春宋雯歌
申请(专利权)人:中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
类型:发明
国别省市:

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