【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
技术介绍
1、抗生素抗性基因常用作用于选择测定的融合配偶体。常用的可选择融合配偶体是抗生素抗性基因。然而，这些方法受到有限的线性应答范围的影响，在所述有限的线性应答范围中，适量的抗生素抗性基因的表达赋予了实际可达到的抗生素浓度的几乎全部程度。旨在克服这一限制的方案采用了如翻译偶联的间接选择方案。到目前为止，尚未提供一种使抗生素抗性基因的表达与可溶性蛋白的表达之间直接相关的测定。本公开解决了此未满足的需求。
技术实现思路
1、在一个实施例中，本公开提供了一种鉴定能够产生所关注的可溶性蛋白的宿主细胞的方法，所述方法包括以下步骤：(a)制备宿主细胞群体，其中所述群体中的每个宿主细胞包括能够表达包括以下的融合蛋白的表达构建体：(i)所关注的蛋白，和(ii)选择蛋白；(b)在允许表达所述融合蛋白的条件下温育(a)中的所述宿主细胞，其中所述条件包括生长物质，所述生长物质包括至少2种协同选择剂；以及(c)使能够生长的宿主细胞可视化；由此鉴定能够产生所关注的可溶性蛋白的宿主细胞。
2、在另一...
【技术保护点】
1.一种鉴定能够产生所关注的可溶性蛋白的宿主细胞的方法，所述方法包括以下步骤：
2.一种鉴定在宿主细胞群体中产生最高量的所关注的可溶性蛋白的宿主细胞的方法，所述方法包括以下步骤：
3.根据权利要求1至2中任一项所述的方法，其进一步包括基于所产生的可溶性蛋白的量对所述宿主细胞进行分箱的步骤。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述选择蛋白是抗生素或抗生素抗性蛋白的靶标。
5.根据权利要求4所述的方法，其中所述选择蛋白是FolA。
6.根据权利要求5所述的方法，其中所述FolA来自大肠杆菌(E.col
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【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种鉴定能够产生所关注的可溶性蛋白的宿主细胞的方法，所述方法包括以下步骤：
2.一种鉴定在宿主细胞群体中产生最高量的所关注的可溶性蛋白的宿主细胞的方法，所述方法包括以下步骤：
3.根据权利要求1至2中任一项所述的方法，其进一步包括基于所产生的可溶性蛋白的量对所述宿主细胞进行分箱的步骤。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述选择蛋白是抗生素或抗生素抗性蛋白的靶标。
5.根据权利要求4所述的方法，其中所述选择蛋白是fola。
6.根据权利要求5所述的方法，其中所述fola来自大肠杆菌(e.coli)。
7.根据权利要求6所述的方法，其中所述fola示出于seq id no:1中。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其包括使用2种协同选择剂，其中所述协同选择剂选自由以下组成的组：抗生素、糖、化学剂、酶底物类似物、酶抑制剂、多价螯合(sequester)生物分子的药剂、螯合剂(chelating agent)和损害细胞壁或细胞膜的药剂。
9.根据权利要求8所述的方法，其中所述2种协同选择剂是甲氧苄啶(trimethoprim)和磺胺甲噁唑(sulfamethoxazole)。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述所关注的蛋白是异源蛋白。
11.根据权利要求10所述的方法，其中所述异源蛋白选自由以下组成的组：抗体、fab、scfv、纳米抗体、t细胞受体和嵌合抗原受体、生长因子、细胞因子、激素、酶或其功能片段。
12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述宿主细胞群体包括宿主细胞文库，其中所述文库包含具有独特基因型和/或被独特基因工程化的细胞。
13.根据权利要求10所述的方法，其中所述文库包括大约一千个至大约十亿个宿主细胞。
14.根据权利要求1至13中任一项所述的方法，其中所述宿主细胞选自由以下组成的组：真核细胞、原核细胞、细菌细胞、哺乳动物细胞和昆虫细胞。
15.根据权利要求14所述的方法，其中所述细菌细胞是大肠杆菌细胞。
16.根据权利要求15所述的方法，其中所述大肠杆菌...
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