基于特异性HRCA等温扩增结核分枝杆菌的序列组及应用制造技术

本发明专利技术涉及基于特异性HRCA等温扩增结核分枝杆菌的序列组及应用。本发明专利技术公开的序列组，包括识别阶段的Lock与Key系列引物，扩增阶段的Loop与Link Primer，利用该引物组进行HRCA反应，其检测快速灵敏，结果可靠稳定。本发明专利技术公开的检测方法，包括：（1）构建具有识别功能的锁钥结构；（2）进行磁选、识别；（3）进行HRCA扩增；（4）识别荧光信号，判定阳性/阴性。本方法利用锁钥结构将结核分枝杆菌插入序列IS6110的多个保守片段设计为靶基因来共同触发HRCA反应，提高了方法的准确性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，涉及基于特异性hrca等温扩增结核分枝杆菌的序列组及应用。

技术介绍

1、结核分枝杆菌是结核病的病原体。早期诊断、及时治疗是有效控制结核病传播蔓延，恢复结核病患者健康的关键。

2、超支化滚环扩增(hrca)是一种新型的体外核酸扩增技术，该技术对温度的要求较低，不需要昂贵精密的温度循环装置，只需要恒定温度下就可以完成，使用hrca技术来进行结核分枝杆菌的检测有利于降低检测操作难度，缩短检测时间，降低检测成本，而且不需要依赖于特定机器，肉眼就可以进行判读。

3、然而，此类分子检测技术受所选插入序列靶标的影响存在假阳性与假阴性的结果，且技术本身也存在非特异性扩增的可能带来假阳性的结果。基于此，提出此专利技术。

技术实现思路

1、针对上述技术问题，本专利技术的目的在于提供一种用于检测结核分枝杆菌的高特异性的hrca方法，利用该方法对结核分枝杆菌进行检测，所得结果可靠稳定。

2、本专利技术具体采用以下技术方案：

3、第一方面，本专利技术提供了一种基于特本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于特异性HRCA等温扩增结核分枝杆菌的序列组，其特征在于，所述序列包括Loop、Mag、Lock1、Lock2、Lock3，引物Seal，引物Branch1和Branch2，

2.根据权利要求1所述的序列组，其特征在于，所述序列组还包括识别引物组，所述识别引物组包括Block1、Block2、Block3、Key1、Key2、Key3，所述Block1、Block2、Block3的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.6-8所示，所述Key1、Key2、Key3的核苷酸序列如SEQ ID NO.9-11所示。

3.一种检测结核分枝杆菌的试剂盒，其特征在于，...

【技术特征摘要】

1.一种基于特异性hrca等温扩增结核分枝杆菌的序列组，其特征在于，所述序列包括loop、mag、lock1、lock2、lock3，引物seal，引物branch1和branch2，

2.根据权利要求1所述的序列组，其特征在于，所述序列组还包括识别引物组，所述识别引物组包括block1、block2、block3、key1、key2、key3，所述block1、block2、block3的核苷酸序列分别如seq id no.6-8所示，所述key1、key2、key3的核苷酸序列如seq id no.9-11所示。

3.一种检测结核分枝杆菌的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中包括权利要求1-2任一所述的序列组。

4.权利要求3所述的试剂盒在制备检测结核分枝杆菌试剂中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述应用包括以下步骤，

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，与磁...

【专利技术属性】
技术研发人员：张祯，张虎，崔键，曾昆，李金凤，王津，蔡籽年，周嘉龙，
申请(专利权)人：江苏省中国科学院植物研究所，
类型：发明
国别省市：