一种基于拉曼光谱技术和化学计量学方法快速识别细胞种类的方法及应用技术

本发明专利技术提供了一种基于拉曼光谱技术和化学计量学方法快速识别细胞种类的方法及应用，属于细胞分析技术领域。本发明专利技术中的方法包括以下步骤：构建适合拉曼光谱检测的细胞承载装置、配制不同细胞种类(人肺癌细胞，人乳腺癌细胞，人神经胶质瘤细胞等)相同浓度的细胞悬浊液样品、采集细胞拉曼光谱信号、分析数据以及识别细胞种类等五个步骤。其中细胞种类的识别是通过采用化学计量学方法分析细胞悬浊液的拉曼光谱来确定的。首先去除细胞拉曼光谱的噪声，然后提取特征值，最后进行模式识别。本发明专利技术利用拉曼光谱技术对细胞种类进行识别，此方法具有快速、无标记、操作简单、适用范围广、重复性好、结果精确度高等优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于细胞分析，尤其涉及一种基于拉曼光谱技术和化学计量学方法快速识别细胞种类的方法及应用。

技术介绍

1、目前，检测细胞是否是癌细胞的方法是在显微镜下观测癌细胞。根据细胞的形态，如：核浆比、细胞核的形态及核内染色体形态等判断是否是癌细胞。然而，这种基于细胞形态观测的病理学检测方法受到包括样品处理过程、光学显微镜分辨率、医生主观经验多种因素影响，导致准确度不理想，比如：美国的乳腺癌的误诊率最高可达43％。

2、对于癌细胞种类的鉴别需要相应的鉴别技术具有特异性，目前则主要采用生物学方法，包括对细胞内特定物质进行细胞染色和荧光标记等，细胞染色的鉴别方法与肿瘤组织切片鉴别类似，而荧光标记则主要基于抗原抗体的特异性结合，这些方法均对细胞本来的生理活性有很大改变甚至破坏，不利于进一步的分析与研究，而且抗原抗体特异性结合易存在假阳性和假阴性的问题。另外，其对样本的处理比较复杂，成本高、效率低，在临床应用中存在很大弊端。若能在物理层面上非接触地对癌细胞进行特异性鉴别，则不但不改变细胞活性，而且可有效解决生物方法中样本前处理的复杂性和整个鉴别过程的效率问本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于拉曼光谱技术和化学计量学方法快速识别细胞种类的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中，所述氟化镁晶体片的厚度为1mm～2mm，所述石英晶体片的厚度为100μm-200μm。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤2)的具体过程为：用含有0.25％EDTA的胰酶将不同种类待检测细胞从细胞培养瓶上消化下来，1400～1600rmp离心4～6min去除上清液，加入PBS将细胞悬浮起来，再次1400～1600rmp离心4～6min弃掉上清液，将细胞洗净，再次加入PBS悬浮细胞，进行细胞计数，配置成各种...

【技术特征摘要】

1.一种基于拉曼光谱技术和化学计量学方法快速识别细胞种类的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中，所述氟化镁晶体片的厚度为1mm～2mm，所述石英晶体片的厚度为100μm-200μm。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤2)的具体过程为：用含有0.25％edta的胰酶将不同种类待检测细胞从细胞培养瓶上消化下来，1400～1600rmp离心4～6min去除上清液，加入pbs将细胞悬浮起来，再次1400～1600rmp离心4～6min弃掉上清液，将细胞洗净，再次加入pbs悬浮细胞，进行细胞计数，配置成各种细胞浓度均为1x 105的不同种类细胞悬浊液样品。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤3)中所述细胞悬浊液样品的滴加方法为：先将18～22μl的细胞悬浊液滴在氟化镁晶体片上，再将石英晶体片盖在其上。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述步骤4)包括：首先将镜头聚焦到没有细胞的位置，采集拉曼光谱作为背景信号，然后将镜头聚焦到细胞的位...

【专利技术属性】
技术研发人员：汤明杰，王化斌，张华，郭缘森，
申请(专利权)人：中国科学院重庆绿色智能技术研究院，
类型：发明
国别省市：