一种柔性抗肿瘤疫苗原料的制备方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种柔性抗肿瘤疫苗原料的制备方法及其应用，属于抗肿瘤疫苗技术领域。具体技术方案为：对肿瘤细胞诱导处理得到MCD细胞；将MCD细胞用紫外线照射处理，无血清培养后收集培养上清；去除杂质后，收集得到柔性抗肿瘤疫苗原料，柔性抗肿瘤疫苗原料为MEV。本发明专利技术利用药物诱导获得了MCD细胞，该细胞具有衰老特征，在遭受损伤刺激时不会快速死亡裂解，有利于EV的提取。利用MCD细胞制备的胞外囊泡MEV，含有大量断裂gDNA和mtDNA，可以作为免疫刺激因子，而且更加柔软，容易被DC细胞吸收，对DC细胞有显著激活作用，并且MEV预处理后的DC细胞，更能适应低氧的肿瘤微环境。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于抗肿瘤疫苗，具体涉及一种柔性抗肿瘤疫苗原料的制备方法及其应用。

技术介绍

1、胞外囊泡（extracellular vesicles，evs）是自然界中细胞生命活动的产物，是一种包裹核酸、蛋白、脂类等分子的纳米级磷脂双分子层颗粒，由细胞释放到细胞外基质的膜性小囊泡，参与细胞通讯、细胞迁移、血管新生和肿瘤细胞生长等过程，广泛地存在于各种体液和细胞上清中，并稳定携带了一些重要的信号分子。肿瘤细胞来源的囊泡（tev），作为一种天然生物材料，含有丰富的免疫刺激因子及胞内/胞膜抗原（包括肿瘤相关抗原taa和肿瘤特异性抗原tsa），并且具有较好地细胞摄取及靶向归巢能力，能够对树突状细胞（dendritic cell，dc）施以有效的刺激，进而将肿瘤抗原呈递给t细胞，激活其对肿瘤的特异性细胞毒作用，并且tev便于工程化改造及联合其他治疗策略。

2、因此，使用tev激活dc是一种极具发展前景的抗肿瘤免疫治疗手段。tev的软硬度与靶细胞吸收率密切相关，有报道称肿瘤干细胞来源tev，硬度更低，载药后易于被肿瘤细胞吸收，增强化疗效果，但实际操作中，患者本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种柔性抗肿瘤疫苗原料的制备方法，其特征在于，所述方法包括：使用药物诱导处理肿瘤细胞，得到MCD细胞；将所述MCD细胞用紫外线照射处理，无血清培养后收集培养上清；去除杂质后，收集得到柔性抗肿瘤疫苗原料，所述柔性抗肿瘤疫苗原料为MEV。

2.根据权利要求1所述的一种柔性抗肿瘤疫苗原料的制备方法，其特征在于，所述紫外线照射处理包括15~18W，253.7nm的紫外灯管，照射5~20min。

3.根据权利要求1所述的一种柔性抗肿瘤疫苗原料的制备方法，其特征在于，所述肿瘤细胞包括小鼠前列腺癌细胞系CAP。

4.根据权利要求1所述的一种柔性抗肿瘤疫苗原料的制...

【技术特征摘要】

1.一种柔性抗肿瘤疫苗原料的制备方法，其特征在于，所述方法包括：使用药物诱导处理肿瘤细胞，得到mcd细胞；将所述mcd细胞用紫外线照射处理，无血清培养后收集培养上清；去除杂质后，收集得到柔性抗肿瘤疫苗原料，所述柔性抗肿瘤疫苗原料为mev。

2.根据权利要求1所述的一种柔性抗肿瘤疫苗原料的制备方法，其特征在于，所述紫外线照射处理包括15~18w，253.7nm的紫外灯管，照射5~20min。

3.根据权利要求1所述的一种柔性抗肿瘤疫苗原料的制备方法，其特征在于，所述肿瘤细胞包括小鼠前列腺癌细胞系cap。

4.根据权利要求1所述的一种柔性抗肿瘤疫苗原料的制备方法，其特征在于，所述药物诱导处理包括使用多西他赛连续处理。

5.根据权利要求1所述的一种柔性抗肿瘤疫苗原料...

【专利技术属性】
技术研发人员：范敏，史剑，汪子涵，吴晓彤，邹一鸣，孙阳洋，沈宇炜，
申请(专利权)人：常州市第一人民医院，
类型：发明
国别省市：