骨肉瘤PDX模型的构建方法及其应用技术

本发明专利技术涉及肿瘤动物模型技术领域，提供一种骨肉瘤PDX模型的构建方法及其应用。PDX模型的构建方法包括步骤：S1骨肉瘤患者肿瘤样本预处理，S2小鼠皮下接种。S1具体包括：先经过生理盐水对肿瘤样本进行清洗，然后将肿瘤样本放置于0~4℃的低温培养液中存储转运，再通过常温的PBS溶液对肿瘤样本进行清洗；采用机械法将肿瘤样本切成2~3mm<supgt;3</supgt;的组织块。S2具体包括：基于肿瘤样本所形成的组织块的数量，对每个患者准备至少2只免疫缺陷小鼠进行PDX模型构建；从每只小鼠的下肢两侧和/或上肢两侧选择接种位点。通过多位点建立的荷瘤模型，可最大程度利用有限的肿瘤样本和有限的实验动物，快速扩种大批量PDX模型，提高建模效率和建模成本。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及肿瘤动物模型，具体涉及一种骨肉瘤pdx模型的构建方法及其应用。

技术介绍

1、病人来源的肿瘤组织（patient derived tumor），来源于患者，肿瘤组织组成多样，异质性完整，具有重要的科研和临床应用价值。随着免疫缺陷小鼠的发展，将病人来源的肿瘤组织接种到免疫缺陷小鼠体内成为可能，为肿瘤药物的开发，免疫治疗的发展以及各种靶向药物的测试提供了非常好的模型。pdx模型（patient-derived xenograft model，pdx）是一种通过将手术切除的病人肿瘤组织接种于免疫缺陷鼠体内而建立的新一代人源肿瘤异种移植模型。这种模型保留了原代肿瘤的组织学、遗传学特征并维持了病人肿瘤的异质性，其药效学结果与临床具有极高的相关性。

2、已有的骨肉瘤pdx模型的构建方法：将患者肿瘤标本使用rpmi 1640培养基（康宁公司，美国纽约）清洗后，切成3~5 mm3的小块，然后用25g穿刺套管针吸入，该套管针用于钝性分离结缔组织，随后通过推动组织套管针，在免疫缺陷小鼠下肢的腹股沟进行皮下组织接种（s.c.）；每周测量一次皮下肿瘤的体本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种骨肉瘤PDX模型的构建方法，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的骨肉瘤PDX模型的构建方法，其特征在于，所述0~4℃的低温培养液中含有青霉素100-500 U/ml和链霉素100-500 ug/ml。

3.根据权利要求2所述的骨肉瘤PDX模型的构建方法，其特征在于，将肿瘤样本放置于0~4℃的低温培养液中存储转运的总时长不超过30分钟。

4.根据权利要求1所述的骨肉瘤PDX模型的构建方法，其特征在于，所述组织块的形状为方形薄片状。

5.根据权利要求4所述的骨肉瘤PDX模型的构建方法，所述免疫缺陷小鼠为6~8周龄T、B、NK细胞...

【技术特征摘要】

1.一种骨肉瘤pdx模型的构建方法，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的骨肉瘤pdx模型的构建方法，其特征在于，所述0~4℃的低温培养液中含有青霉素100-500 u/ml和链霉素100-500 ug/ml。

3.根据权利要求2所述的骨肉瘤pdx模型的构建方法，其特征在于，将肿瘤样本放置于0~4℃的低温培养液中存储转运的总时长不超过30分钟。

4.根据权利要求1所述的骨肉瘤pdx模型的构建方法，其特征在于，所述组织块的形状为方形薄片状。

5.根据权利要求4所述的骨肉瘤pdx模型的构建方法，所述免疫缺陷小鼠为6~8周龄t、b、...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋伟杰，王兆松，田建飞，杨吉龙，
申请(专利权)人：天津市肿瘤医院天津医科大学肿瘤医院，
类型：发明
国别省市：