一种检测逆转录病毒载体物理滴度的ELISA试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及逆转录病毒载体滴度测定技术领域，具体涉及通过ELISA试剂盒检测逆转录病毒的胞膜蛋白GALV‑env来确定逆转录病毒的物理滴度。本发明专利技术制备得到逆转录病毒胞膜蛋白GALV‑env的ELISA检测试剂盒，该试剂盒包括捕获抗体、检测抗体、GALV‑env蛋白标准品、酶标板、稀释液和封闭液。该试剂盒通过检测GALV‑env的蛋白量，并进行换算得到逆转录病毒的物理滴度，不同于通过定量逆转录病毒基因组的核酸来表征逆转录病毒的物理滴度，本发明专利技术具有操作简单、快速、灵敏度高等优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及逆转录病毒载体滴度测定，具体涉及通过elisa试剂盒检测逆转录病毒的胞膜蛋白galv-env来确定逆转录病毒的物理滴度。

技术介绍

1、在car-t细胞生产中会用到的逆转录病毒载体是一种包括基于莫洛尼鼠白血病病毒的gag-pol (mulv-gag-pol) 和长臂猿白血病病毒的胞膜蛋白（galv-env）所构建的复制缺陷型病毒。galv-env是位于病毒粒子表面的膜糖蛋白，能介导病毒颗粒附着在宿主细胞表面，进而与宿主细胞膜表面受体融合，在病毒感染宿主细胞过程中发挥重要作用。逆转录病毒作为细胞治疗的关键载体，由于其高度的复杂性，在工艺开发和规模生产阶段，为确保产品的质量和安全性，需要有准确可靠的分析方法来监测。

2、逆转录病毒的功能滴度通过病毒来感染目标细胞来衡量单位体积内有生物活性的病毒颗粒，通常检测周期相对较长。而逆转录病毒的物理滴度是通过测定逆转录病毒的基因组或逆转录病毒的蛋白浓度来定义单位体积内病毒颗粒的总数，检测周期相对较短，比较适用于逆转录病毒生产的中间过程阶段的检测。

3、测定逆转录病毒的基因组的方法是r本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种检测逆转录病毒载体物理滴度的ELISA试剂盒，包括捕获抗体、检测抗体、GALV-env蛋白标准品、酶标板，其特征在于，所述酶标板经保护液处理，保护液含1-2wt%戊二酸酯。

2. 根据权利要求1所述试剂盒，其特征在于，所述捕获抗体为F8，F8重链的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示，F8轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示，F8重链的DNA序列如SEQ IDNO.9所示，F8轻链的DNA序列如SEQ ID NO.10所示。

3. 根据权利要求1所述试剂盒，其特征在于，所述检测抗体为C9-biotin；C9-biotin由C9和生物素偶联得到；C...

【技术特征摘要】

1.一种检测逆转录病毒载体物理滴度的elisa试剂盒，包括捕获抗体、检测抗体、galv-env蛋白标准品、酶标板，其特征在于，所述酶标板经保护液处理，保护液含1-2wt%戊二酸酯。

2. 根据权利要求1所述试剂盒，其特征在于，所述捕获抗体为f8，f8重链的氨基酸序列如seq id no.5所示，f8轻链的氨基酸序列如seq id no.6所示，f8重链的dna序列如seq idno.9所示，f8轻链的dna序列如seq id no.10所示。

3. 根据权利要求1所述试剂盒，其特征在于，所述检测抗体为c9-biotin；c9-biotin由c9和生物素偶联得到；c9重链的氨基酸序列如seq id no.3所示，c9轻链的氨基酸序列如seq id no.4所示，所述c9重链dna序列如seq id...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨红，朱建高，杨文君，
申请(专利权)人：浙江康佰裕生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：