【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及细胞仪领域,尤其是涉及流式细胞分析方法以及装置。
技术介绍
1、流式细胞仪是一种细胞分析设备,可以快速地进行细胞的分析、计数,并通过荧光标记的方法进行细胞膜蛋白、细胞核dna含量等指标进行快速的统计,是生物学实验室不可或缺的工具。流式细胞仪原理大致如下:细胞或者生物颗粒在流体动力学作用下被聚焦在流动池的中心流线上,形成单细胞或颗粒的队列。这些样本通过激光焦点时,会产生前向散射光、侧向散射光,标本上的荧光标记物会同时产生的荧光,仪器的光学系统将这些信号光收集,并通过分光系统将特定波长的光信号输出到光电探测器中转化为电信号,电子学系统进行模数转换及数据处理,并通过计算机软件进行分析统计,从而实现细胞的计数及统计分析。
2、但是传统流式细胞仪在样本通过光斑的同时进行荧光标记物的检测,荧光的检测下限被激发光的背景散射光及拉曼散射等因素影响,检测灵敏度受到限制,无法满足某些细胞膜低表达蛋白的检测需求。
技术实现思路
1、为了克服现有技术的不足,本专利技术的目的之一在于提供一
...【技术保护点】
1.一种流式细胞分析方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的流式细胞分析方法,其特征在于:所述计算延时时间步骤具体为:根据流道尺寸以及流道中样本的流速预估延时时间为t,控制所述预估延时时间t至少比所述长寿命荧光染料的荧光寿命小4微秒以上,按照固定值每步左右移动预估延时时间,并采集对应的荧光信号,直到测得的荧光信号最大,将对应的延时时间确定为荧光检测延时时间td,所述延时时间td处于所述长寿命荧光染料的荧光发光强度随时间变化的缓变区。
3.根据权利要求2所述的流式细胞分析方法,其特征在于:所述固定值为0.1us。
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...【技术特征摘要】
1.一种流式细胞分析方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的流式细胞分析方法,其特征在于:所述计算延时时间步骤具体为:根据流道尺寸以及流道中样本的流速预估延时时间为t,控制所述预估延时时间t至少比所述长寿命荧光染料的荧光寿命小4微秒以上,按照固定值每步左右移动预估延时时间,并采集对应的荧光信号,直到测得的荧光信号最大,将对应的延时时间确定为荧光检测延时时间td,所述延时时间td处于所述长寿命荧光染料的荧光发光强度随时间变化的缓变区。
3.根据权利要求2所述的流式细胞分析方法,其特征在于:所述固定值为0.1us。
4.根据权利要求2所述的流式细胞分析方法,其特征在于:延时时间td为70~90us。
5.根据权利要求1所述的流式细胞分析方法,其特征在于:在所述荧光信号检测步骤中,在所述散射光检测点检测到散射光信号具体为:在数据采集单元对前向散射通道或者侧向散射通道设置一个阈值,当前向散射或者侧向散射通道的信号值大于阈值时,判断检测到散射光信号。
6.根据权利要求1所述的流式细胞分析方法,其特征在于:在所述标记长寿命荧光步骤中,所述长寿荧光染料的荧光寿命>100微秒。
7.一种流式细胞分析装置,用于实施如权利要求1-6任意一项所述的流式细胞分析方法,所述流式细胞分析装置包括液流单元,所述液流单元包括流动池以及与所述流动池连通的进样针,所述流动池包括透明的光学检测区,所述光学检测区设有流道,通过所述进样针进入所述...
【专利技术属性】
技术研发人员:陈忠祥,王策,马玉婷,裴智果,钟金凤,严心涛,宋飞飞,王耀,何帅,陈建生,陈梦丽,武晓东,
申请(专利权)人:中国科学院苏州生物医学工程技术研究所,
类型:发明
国别省市:
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