微生物催化生产γ-氨基丁酸的方法技术

本发明专利技术公开了一种制备γ‑氨基丁酸的方法，其包括如下步骤：以L‑谷氨酸为底物，在磷酸吡哆醛存在下，使用过表达谷氨酸脱羧酶SEQ ID NO:1或者其突变体的大肠杆菌工程菌菌体催化脱羧反应，得到γ‑氨基丁酸，提高了工业经济性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于酶催化，具体地说，涉及一种微生物催化生产γ-氨基丁酸的方法。

技术介绍

1、γ-氨基丁酸(gaba)是一种天然存在的非蛋白质功能性氨基酸，是动物体内一种必需的抑制性神经递质。gaba具有多种生理功能，例如调节神经系统疾病、诱导低血压和利尿作用等，因此开发含有gaba的食品和药物具有非常良好的经济前景。此外，gaba还可作为一种中间体，用于制备多种具有高附加值的化学品比如2-吡咯烷酮和n-乙烯基吡咯烷酮等。

2、生产γ-氨基丁酸的方法有多种，包括化学合成、生物合成和植物富集法。化学合成法中需要大量有机溶剂，且反应十分剧烈，都存在反应不容易控制、成本比较高的缺点。植物富集法是一种新型开发的合成萃取提纯技术，它是用gaba含量较高的植物进行分离提取，主要有以下两种：其中一种是利用溶剂萃取提纯法，另一种是柱分离制备法，但该方法耗时长且产率较低。谷氨酸脱羧酶(gad，ec 4.1.1.15)是一种磷酸吡哆醛(pyridoxal 5’-phosphate，plp)类酶，是生物合成gaba的关键酶(sardana r k,awad r,et a本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种制备γ-氨基丁酸的方法，其特征在于，包括如下步骤：以L-谷氨酸为底物，在磷酸吡哆醛存在下，使用过表达氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的谷氨酸脱羧酶或者其突变体的大肠杆菌工程菌菌体催化脱羧反应，得到γ-氨基丁酸，其中所述突变体是氨基酸序列与SEQ ID NO:1有90％以上、且酶活力相比SEQ ID NO:1提高的多肽。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述突变体是氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示的A42V/R427H突变体。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述大肠杆菌工程菌基因组中整合了多拷贝的核苷酸序列如SEQ ID NO:...

【技术特征摘要】

1.一种制备γ-氨基丁酸的方法，其特征在于，包括如下步骤：以l-谷氨酸为底物，在磷酸吡哆醛存在下，使用过表达氨基酸序列如seq id no:1所示的谷氨酸脱羧酶或者其突变体的大肠杆菌工程菌菌体催化脱羧反应，得到γ-氨基丁酸，其中所述突变体是氨基酸序列与seq id no:1有90％以上、且酶活力相比seq id no:1提高的多肽。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述突变体是氨基酸序列如seq id no:3所示的a42v/r427h突变体。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述大肠杆菌工程菌基因组中整合了多拷贝的核苷酸序列如seq id no:2所示的谷氨酸脱羧酶编码基因或者核苷酸序列如seq id no:4所示的谷氨酸脱羧酶a42v/r427h突变体编码基因。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，大肠杆菌工程菌基因组中整合的所述编码基因的拷贝数为两个以上拷贝。

5.如权利要求3所述的方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：范文超，黄睿，陈涛，薛钰婷，
申请(专利权)人：华睿生物技术滁州有限公司，
类型：发明
国别省市：