用于测量抗体依赖性细胞介导的细胞毒性的3D生物测定制造技术

本文公开了用于测量抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)的3D生物测定。具体而言，本公开涉及一种评估ADCC的方法，包括将抗体或其功能性抗体片段与表达FcR的靶细胞和效应细胞在允许这些物质相互作用的条件下于3D细胞培养中接触；检测生物标志物CXCL9、CXCL10和CXCL11和选自UBD、IDOL、STEAP4、JAG1、APOL4、GBP4、CD274、GBP5、CCL3和CCL4中的0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10种生物标志物的表达水平变化；并根据表达结果评估该抗体的ADCC。本文还提供了与该方法相关的用途和产品。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

本公开涉及生物制药分析、临床诊断和治疗领域，具体涉及用于测量抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(adcc)的3d生物测定。

技术介绍

1、抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(adcc)，也称抗体依赖性细胞毒性，是一种免疫机制，通过这种机制，带有fc受体的效应细胞可识别并杀死表面表达肿瘤或病原体衍生抗原的被抗体包覆的靶细胞。adcc是许多治疗性抗体(如单克隆和双特异性抗体)主要作用模式之一[1]。adcc需要效应细胞(例如nk细胞、中性粒细胞、巨噬细胞)、靶细胞(例如表达感兴趣抗原的实体肿瘤细胞)和调理素化抗体[2]。效应细胞上的fcγriiia与调理素化的靶细胞接合，可触发导致adcc的一系列信号转导和生物事件。

2、简而言之，导致抗体依赖性效应细胞介导的靶细胞杀伤的四个主要阶段和机制包括：(1)识别靶细胞和效应细胞表面的fc受体；(2)效应细胞内细胞src激酶对免疫受体酪氨酸基激活基序(itam)的磷酸化；(3)触发效应细胞中三个主要下游信号通路，导致细胞毒性颗粒极化和释放；以及(4)通过主要的穿孔素/颗粒酶细胞死亡通路杀死靶细胞。</p>

3、由于本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种评估抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)的方法，其中所述方法包括：

2.如权利要求1所述的方法，其中靶细胞能够被所述抗体或其功能性抗体片段特异性识别并结合，例如靶细胞在其表面表达抗体特异性抗原表位；和/或

3.如权利要求1所述的方法，其中所述效应细胞表达FcγR，优选FcγRIIIa。

4.如权利要求1所述的方法，其中所述效应细胞选自自然杀伤(NK)细胞、外周血单核细胞(PBMC)、巨噬细胞、细胞毒性T淋巴细胞及中性粒细胞，以及前述任一者与所述抗体或其功能性抗体片段的偶联物。

5.如权利要求1所述的方法，其中所述抗体为单克隆抗体...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种评估抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(adcc)的方法，其中所述方法包括：

2.如权利要求1所述的方法，其中靶细胞能够被所述抗体或其功能性抗体片段特异性识别并结合，例如靶细胞在其表面表达抗体特异性抗原表位；和/或

3.如权利要求1所述的方法，其中所述效应细胞表达fcγr，优选fcγriiia。

4.如权利要求1所述的方法，其中所述效应细胞选自自然杀伤(nk)细胞、外周血单核细胞(pbmc)、巨噬细胞、细胞毒性t淋巴细胞及中性粒细胞，以及前述任一者与所述抗体或其功能性抗体片段的偶联物。

5.如权利要求1所述的方法，其中所述抗体为单克隆抗体、嵌合抗体、多价抗体、人源化抗体或人类抗体。

6.如权利要求1所述的方法，其中所述抗体、效应细胞和/或靶细胞获自或衍生自患者或健康捐赠者；和/或一种或多种抗体、效应细胞和/或靶细胞用于所述方法中。

7.如权利要求1所述的方法，其中3d细胞培养为无支架3d细胞培养或有支架3d细胞培养。

8.如权利要求1所述的方法，其中3d细胞培养为旋转细胞培养系统(rccs)，或使用水凝胶、惰性基质和微流控器官芯片的有支架3d细胞培养；或使用低粘附板、微图案表面和悬滴的无支架3d细胞培养。

9.如权利要求1所述的方法，其中3d细胞培养为旋转细胞培养系统，例如设置旋转速度为60～200转/分钟的旋转细胞培养系统。

10.如权利要求1所述的方法，其中抗体、靶细胞和效应细胞中的一种或多种被标记；和/或

11.如权利要求1所述的方法，其中所述方法还包括确定抗体或其功能性抗体片段是否诱导对靶细胞的adcc。

12.如权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾晓青，陈敏，
申请(专利权)人：上海药明生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：