多重置换扩增试剂盒和方法技术

技术编号:42219704 阅读:29 留言:0更新日期:2024-07-30 18:59
本申请公开了一种多重置换扩增试剂盒和方法,其中,多重置换扩增试剂盒包括用于扩增核酸模板的多重置换扩增试剂和可结合核酸模板扩增产物的荧光定量试剂。本申请的多重置换扩增试剂盒分别对阳性样本和不含模板的阴性样本进行扩增,利用多重置换扩增过程检测到的荧光定量试剂发出的荧光信号,可得到显著不同的扩增曲线,从而利用该扩增曲线可区分阳性样本和不含模板的阴性样本。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及分子生物,具体而言,涉及一种多重置换扩增试剂盒和方法


技术介绍

1、单细胞技术的发展使科学家能够研究组织内每一个细胞的基因组、转录组、甚至多组学信息,以全面了解其遗传属性和时空状态。对于数量极其稀少的细胞类型,如卵母细胞、循环肿瘤细胞等,由于遗传物质含量极低,需要对dna、rna进行大量预扩增以满足当下基因检测所需的浓度要求。

2、在辅助生殖领域,基于单细胞的全基因组扩增技术(whole-genomeamplification,wga)已被应用于第三代试管婴儿胚胎植入前遗传学检测(preimplantation genetic testing,pgt)。多重置换扩增(multiple displacementamplification,mda)是较好的wga技术,主要利用随机引物退火至模板dna链,并通过具有链置换能力的phi29聚合酶进行延伸。被置换的互补链结合随机引物后也能够作为新模板进行扩增反应,从而在短时间内合成大量的dna产物。mda优势包括:(1)能连续扩增10kb以上的dna片段而不从模板上解离;(2)phi29酶具有本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种多重置换扩增试剂盒,其特征在于,包括用于扩增核酸模板的多重置换扩增试剂和可结合核酸模板扩增产物的荧光定量试剂。

2.根据权利要求1所述的多重置换扩增试剂盒,其特征在于,所述多重置换扩增试剂盒满足以下特征(1)~(2)中的至少一个:

3.根据权利要求1或2所述的多重置换扩增试剂盒,其特征在于,所述多重置换扩增试剂包括随机引物、链置换DNA聚合酶、磷酸缓冲试剂和细胞裂解试剂中的至少一种。

4.荧光定量试剂在制备多重置换扩增试剂盒中的用途,所述多重置换扩增试剂盒包括用于扩增核酸模板的多重置换扩增试剂和所述荧光定量试剂,所述荧光定量试剂可结合核酸模板扩...

【技术特征摘要】

1.一种多重置换扩增试剂盒,其特征在于,包括用于扩增核酸模板的多重置换扩增试剂和可结合核酸模板扩增产物的荧光定量试剂。

2.根据权利要求1所述的多重置换扩增试剂盒,其特征在于,所述多重置换扩增试剂盒满足以下特征(1)~(2)中的至少一个:

3.根据权利要求1或2所述的多重置换扩增试剂盒,其特征在于,所述多重置换扩增试剂包括随机引物、链置换dna聚合酶、磷酸缓冲试剂和细胞裂解试剂中的至少一种。

4.荧光定量试剂在制备多重置换扩增试剂盒中的用途,所述多重置换扩增试剂盒包括用于扩增核酸模板的多重置换扩增试剂和所述荧光定量试剂,所述荧光定量试剂可结合核酸模板扩增产物。

5.根据权利要求4所述的用途,其特征在于,所述多重置换扩增试剂盒满足以下...

【专利技术属性】
技术研发人员:肖翔赵丁丁孔令印梁波
申请(专利权)人:苏州贝康医疗器械有限公司
类型:发明
国别省市:

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