【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药物分析，涉及一种利用放射性标记方法结合基质扣除的数据处理策略研究人血浆维卡格雷及其巯基代谢产物体内命运的方法。
技术介绍
1、巯基类药物因其独特的生物活性和广泛的临床应用而受到重视，维卡格雷(vicagrel)是一种新型抗血小板巯基类药物，其在体内会被代谢活化成巯基活性代谢物。然而，其巯基活性代谢物在体内的研究面临诸多挑战：
2、（1）药物的稳定性问题：巯基类药物维卡格雷在生物体内易受到氧化、还原等化学反应的影响，导致药物结构改变或活性丧失，这给药物的长期跟踪和代谢产物的鉴定带来了困难。
3、（2）生物样本复杂性：生物样本如血液、尿液和组织等含有大量的内源性物质，这些物质可能与药物发生相互作用，影响维卡格雷及其巯基代谢物的检测和分析。
4、（3）分析方法的灵敏度和准确性：传统的分析方法如液相色谱-质谱联用（lc-ms/ms）虽然灵敏度高，但在分析巯基类药物维卡格雷时，往往需要复杂的样品前处理步骤，且容易受到基质效应的干扰，影响结果的准确性。
5、（4）数据处理的复杂性：巯基类药物维卡格雷的药代动力学过程复杂，涉及多个房室和多种代谢途径，传统的数据处理方法难以准确描述药物在体内的动态变化。
6、（5）模型的适用性和预测能力：现有的药代动力学模型可能无法充分考虑巯基类药物维卡格雷的特殊代谢特性，导致模型预测与实际观测数据存在偏差。
7、因此巯基类药物维卡格雷的命运（吸收、分布、代谢和排泄）很难定性和定量地评价。
8、放射性标记技术有很
9、在血液收集过程中选择合适的衍生化试剂是非常重要的，本专利技术技术人员对比了三种不同的衍生化试剂， n-乙基马来酰亚胺（nem）、2-溴-3'-甲氧基苯乙酮（mpb）和碘乙酰胺（iam）。其中，iam是很强的烷基化试剂，常温下即可与巯基发生烷基化，也与羟基和氨基发生反应，产生肩峰，另外iam见光易分解，需要避光，不可配制储存溶液，需现用现称限制了其使用。nem衍生化后产生会两个同分异构体，在主峰旁边产生一个小于5%肩峰。最终确定衍生化试剂mpb，mpb与巯基化合物定量在0.1-200 ng/ml内有良好的线性范围，衍生化产物稳定性满足测试要求。
10、背景扣除策略是通过建立一个背景信号模型，从原始质谱数据中准确识别并去除背景噪声，从而提高信号的信噪比。质量亏损过滤技术是在质谱分析中，通过分析分子离子与其碎片离子之间的质量差异，有效地识别和过滤掉非目标化合物的信号，从而提高数据的特异性。基质扣除技术是融合背景扣除与质量亏损过滤的质谱数据处理策略，旨在通过这两个关键步骤来优化质谱数据的处理，基质扣除技术的具体操作为：
11、（1）背景信号建模：利用已知的空白样品（不含目标化合物的样品）生成背景信号模型，通过统计分析，建立背景噪声的数学模型，该模型能够描述背景噪声的分布特征；
12、（2）信号预处理：对原始质谱数据进行预处理，包括基线校正、噪声平滑等，以减少后续分析中的误差；
13、（3）背景扣除：将背景信号模型应用于原始质谱数据，通过计算每个质量点的背景信号，从总信号中扣除背景噪声，得到净质谱数据；
14、（4）质量亏损分析：对净质谱数据进行质量亏损分析，识别出与目标化合物质量亏损模式不符的信号，这些信号可能是非目标化合物或杂质；
15、（5）信号过滤：根据质量亏损分析的结果，设计过滤规则，从净质谱数据中移除非目标信号，保留与目标化合物相关的信号；
16、（6）数据重构：对过滤后的质谱数据进行重构，生成新的质谱图，该图仅包含目标化合物的信号；
17、（7）结果验证：通过与已知标准品的质谱数据进行比较，验证融合策略的有效性和准确性。
18、现有的分析药物及其代谢物技术主要有两类，一种是液相色谱串联质谱（lc-ms/ms）法，一种是试剂盒法。lc-ms/ms可以准确、快速的定量已知的药物和代谢物，缺点是需要合成代谢物的标准品，而药物在体内的代谢物可能会有几十上百种，合成需要花费大量的人力物力，且合成代谢物的平均时间是两周，这决定了合成所有代谢物几乎是不可能的，申请号cn201910779635.9，提供了一种同时准确定量分析人血浆维卡格雷及其主要代谢产物的检测试剂盒，其具有简便、易携带等优势。但上述两种方法均无法全面的表征体内的代谢物谱，包括代谢物的种类和绝对含量，且上述两种方法均是定量的检测，无法全面地检测和鉴定所有的代谢物，无法获得药物体内的代谢和命运信息。为了准确分析维卡格雷及其巯基代谢产物体内命运以指导临床精准用药，全面地检测和鉴定所有的巯基代谢产物，亟需一种全面、高效、准确的方法研究维卡格雷及其巯基代谢产物体内命运。
技术实现思路
1、为达到上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
2、一种研究人血浆维卡格雷及其巯基代谢产物体内命运的方法，包括以下步骤：
3、（1）放射性标记维卡格雷药物的制备；
4、（2）维卡格雷药物的配制、检测和给药；
5、（3）生物样本的采集与前处理；
6、（4）放射性测量；
7、（5）代谢物鉴定；
8、（6）基质扣除技术以及非线性混合模型数据处理。
9、进一步地，步骤（1）中，所述放射性标记维卡格雷药物的制备的具体操作为：利用放射性同位素14c对维卡格雷进行标记，标记位点为酯的羰基碳原子上；
10、为维持稳定性，将120 μci的放射性标记的维卡格雷和20 mg维卡格雷混合，并溶解在3 ml的乙醇中，并将混合液保存在-80℃冰箱中。
11、进一步地，步骤（2）中，所述维卡格雷药物的配制、检测和给药的具体操作为：
12、受试者在禁食10小时后，单次口服混悬液，同时准确测定每瓶给药溶液的放射性，并在5 min内饮用冲洗液，总量为240ml，所述混悬液是将所述混合液用80 ml纯水稀释；
13、所述受试者在给药后的1小时内禁止饮水，4小时内禁食。
14、进一步地，步骤（3）中，所述生物样本的采集与前处理的具体操作为：
15、所述受试者给药前和给药后0.25、0.5、1、2、4、8和24 h采集全血样本18 ml；
16、取7 ml的全血样品与70 μl的500 mm 2-溴-3'-甲氧基苯乙酮混合，反应10 min后进行离心。
17、进一步地，步骤（6）中，所述生物样本的基质扣除技术以及非线性混合模型数据处理的具体操作为：采用给药前的血浆质本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种研究人血浆维卡格雷及其巯基代谢产物体内命运的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中，所述放射性标记维卡格雷药物的制备的具体操作为：
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述维卡格雷药物的配制、检测和给药的具体操作为：
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述生物样本的采集与前处理的具体操作为：
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（6）中，所述生物样本的基质扣除技术以及非线性混合模型数据处理的具体操作为：采用给药前的血浆质谱数据作为对照，扣除对照组中含有的质谱信号，同时辅助以质量亏损过滤的筛选，扣除基质中含有的背景质谱信号。
【技术特征摘要】
1.一种研究人血浆维卡格雷及其巯基代谢产物体内命运的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1）中，所述放射性标记维卡格雷药物的制备的具体操作为：
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述维卡格雷药物的配制、检测和给药的具体操作为：
4.根据权利...
【专利技术属性】
技术研发人员：唐崇壮，刁星星，郑元东，
申请(专利权)人：苏州锐迪欧医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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