一种体外扩增NK细胞的培养方法技术

本发明专利技术属于细胞技术领域，具体涉及一种体外扩增NK细胞的培养方法。所述培养方法包括以下步骤：从外周血中分离出单个核细胞，得到外周血单个核细胞；将所述外周血单个核细胞接种到经包被液预包被的细胞培养瓶中，并添加培养基进行细胞培养，得到细胞悬液；对所述细胞悬液连续培养14‑17天，得到经体外扩增的NK细胞；所述培养基包含IL‑2、IL‑15、IL‑21、IL‑7、IL‑18和自体血浆。所述培养方法得到的高纯度和高活性NK细胞，适合医药产业制备细胞治疗药物，显著优于现有技术。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于细胞，具体涉及一种体外扩增nk细胞的培养方法。

技术介绍

1、nk细胞（natural killer cell，自然杀伤细胞）是人体内重要的免疫细胞类型之一，在机体防御和抗肿瘤中发挥着重要的作用。nk细胞在对抗肿瘤中，主要通过两条路径杀伤肿瘤细胞，一方面是活化的nk细胞可以通过释放穿孔素和颗粒酶或通过死亡受体对肿瘤细胞进行直接杀伤，另一方面是nk细胞可以通过分泌细胞因子和趋化因子，从而通过免疫调节促进肿瘤细胞的杀伤作用。

2、nk细胞属于淋巴细胞，占人外周血淋巴细胞的10%-20%，占脐带血淋巴细胞的5%，可在没有抗原预先致敏的情况下非特异性杀伤肿瘤细胞和病毒感染细胞。值得注意的是，人体自身nk细胞的含量有限，且nk细胞无法自然产生体内扩增、存活以及细胞毒性作用所必需的细胞因子。因此，获得足够数量的nk细胞，同时保持nk细胞具有较高的纯度和杀伤能力，是nk细胞在临床应用方面的一个关键技术障碍。如何体外扩增获得高纯度高活性的nk细胞意义重大。

技术实现思路

1、针对现有技术的不足，本专本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种体外扩增NK细胞的培养方法，其特征在于，所述培养方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述培养基还包含植物凝集素和胰岛素-转铁蛋白-硒-X。

3.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述培养基还包含用于促进NK细胞扩增的营养物质。

4.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，步骤（2）中所述包被液包含PBS、Retronectin和CD16抗体。

5.根据权利要求4所述的培养方法，其特征在于，所述CD16抗体为鼠抗人CD16抗体。

6.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，步骤（1...

【技术特征摘要】

1.一种体外扩增nk细胞的培养方法，其特征在于，所述培养方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述培养基还包含植物凝集素和胰岛素-转铁蛋白-硒-x。

3.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述培养基还包含用于促进nk细胞扩增的营养物质。

4.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，步骤（2）中所述包被液包含pbs、retronectin和cd16抗体。

5.根据权利要求4所述的培养方法，其特征在于，所述cd16抗体为鼠抗人cd16抗体。...

【专利技术属性】
技术研发人员：董忠军，程晨，梁仲恒，郑翔芳，
申请(专利权)人：广州希灵生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：