一种用于检测食源性弧菌的引物探针组合、试剂盒及方法技术

技术编号:42197510 阅读:35 留言:0更新日期:2024-07-30 18:45
本发明专利技术公开一种用于检测食源性弧菌的引物探针组合、试剂盒及方法,属于致病性弧菌检测技术领域。本发明专利技术基于五重荧光定量PCR(qPCR)的方法实现对溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、霍乱弧菌(Vibrio cholerae)、拟态弧菌(Vibrio mimicus)、河流弧菌(Vibrio fluvialis)和创伤弧菌(Vibrio vulnificus)五种主要食源性弧菌的定量检测。其次,本发明专利技术通过优化引物探针和PCR反应体系,筛选得到特异性强、扩增效果好、灵敏度高的引物探针组合,并利用所述引物探针制备得到可用于检测五种食源性弧菌的试剂盒。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于致病性弧菌检测,具体涉及一种用于检测食源性弧菌的引物探针组合、试剂盒及方法


技术介绍

1、食源性疾病是全球公共卫生领域面临的重大挑战之一,这些疾病通常由摄入被病原体污染的食物或水引起。其中,弧菌属( vibrio)细菌是一组重要的食源性致病菌,包括副溶血性弧菌、霍乱弧菌、拟态弧菌、河流弧菌和创伤弧菌。

2、尽管已有多种方法用于检测食源性弧菌,如培养法、免疫学方法和分子生物学方法等,但这些方法往往存在检测时间长、操作复杂、灵敏度和特异性有限等不足。培养法是传统的金标准,但需要长时间的培养,而且对于某些条件苛刻的弧菌种类,其灵敏度和特异性不足。免疫学方法,如酶联免疫吸附试验(elisa),虽然比培养法快,但可能受到交叉反应的影响,减少了特异性。分子生物学方法,尤其是聚合酶链式反应(pcr)技术,提供了更高的灵敏度和特异性,但传统pcr方法通常只能检测单一病原,且操作繁琐。

3、中国专利文献cn108841980a、cn108841979a、cn108841925a公开一种本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于检测食源性弧菌的引物探针组合,所述食源性弧菌为溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、霍乱弧菌(Vibrio cholerae)、拟态弧菌(Vibrio mimicus)、河流弧菌(Vibrio fluvialis)和创伤弧菌(Vibrio vulnificus)的组合,所述引物探针组合由1)-5)所示的上下游引物和探针组成:

2.根据权利要求1所述的引物探针组合,其特征在于,所述探针的5’端标记有荧光报告基团,且所述探针的荧光报告信号互不干扰;所述探针的3’端标记有荧光淬灭基团。

3.在本专利技术的具体实施方式中,用于检测所述五...

【技术特征摘要】

1.一种用于检测食源性弧菌的引物探针组合,所述食源性弧菌为溶血性弧菌(vibrio parahaemolyticus)、霍乱弧菌(vibrio cholerae)、拟态弧菌(vibrio mimicus)、河流弧菌(vibrio fluvialis)和创伤弧菌(vibrio vulnificus)的组合,所述引物探针组合由1)-5)所示的上下游引物和探针组成:

2.根据权利要求1所述的引物探针组合,其特征在于,所述探针的5’端标记有荧光报告基团,且所述探针的荧光报告信号互不干扰;所述探针的3’端标记有荧光淬灭基团。

3.在本发明的具体实施方式中,用于检测所述五种食源性弧菌的探针5’端标记的荧光报告基团分别选自fam、hex、rox、cy5和quasar705。

4.一种权利要求1-3任一所述的引物探针组合在制备用于检测食源性弧菌产品中的用途。

5.一种用于检测食源性...

【专利技术属性】
技术研发人员:张鹏航张晓媛刘玉竹王迪王丽丽
申请(专利权)人:北京市疾病预防控制中心
类型:发明
国别省市:

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