一种脐带间充质干细胞hUC-MSCs的检测方法技术

本发明专利技术涉及干细胞检测技术领域，特别是涉及一种脐带间充质干细胞hUC‑MSCs的检测方法。提取脐带间充质干细胞hUC‑MSCs的RNA，反转录为cDNA，将得到的cDNA进行PCR扩增，得到扩增产物，将所述步骤2)得到的扩增产物进行电泳检测。核酸电泳具有高效性、灵敏度高、分辨率高等特点，本方案采取核酸电泳对SSEA‑4、NANOG、OCT‑4、SOX2四个基因进行检测，可以在短时间内将其按核酸分子大小不同进行高效的分离和检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及干细胞检测，特别是涉及一种脐带间充质干细胞huc-mscs的检测方法。

技术介绍

1、间充质干细胞(mesenchymal stromal/stem cell，msc)，是一类存在于多种组织(如骨髓、脐带血、脐带组织、胎盘组织和脂肪组织等)，具有多向分化潜能，非造血干细胞的成体干细胞。这类干细胞具有向多种间充质系列细胞(如成骨、成软骨及成脂肪细胞等)或非间充质系列的细胞分化潜能，并具有独特的细胞因子分泌功能。

2、间充质干细胞的多能性(multipotent)是指具有形成机体内超过一种类型细胞的能力，在体外可诱导分化为骨和脂肪等多种功能细胞，并能表达调控细胞向其他组织细胞类型或器官分化的基因特性(如ssea-4、oct-4、sox-2和nanog基因均为多能性基因)。间充质干细胞是以细胞分裂的方式产生新细胞的特性，包括细胞周期中各不同阶段所占比例以及细胞分裂过程中细胞数量随时间变化的特征。需要对脐带间充质干细胞huc-mscs分泌的再生因子进行检测，以把控间充质干细胞的质量要求。

技术实现思路<本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种脐带间充质干细胞hUC-MSCs的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤1)反转录的体系为：10mM的dNTP 1μL、2.5mM的Oligo dT-接头引物1μL、模板RNA1μL、500U/μL的逆转录酶0.5μL、40U/μL的RNA酶抑制剂0.5μL、5×RT-PCR缓冲液4μL和双蒸水12μL。

3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述逆转录的扩增程序为：将所述dNTP、Oligo dT-接头引物、模板RNA用双蒸水补足10μL，进行65℃预变性5min，再与逆转录酶、RNA酶抑制剂...

【技术特征摘要】

1.一种脐带间充质干细胞huc-mscs的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤1)反转录的体系为：10mm的dntp 1μl、2.5mm的oligo dt-接头引物1μl、模板rna1μl、500u/μl的逆转录酶0.5μl、40u/μl的rna酶抑制剂0.5μl、5×rt-pcr缓冲液4μl和双蒸水12μl。

3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述逆转录的扩增程序为：将所述dntp、oligo dt-接头引物、模板rna用双蒸水补足10μl，进行65℃预变性5min，再与逆转录酶、rna酶抑制剂、5×rt-pcr...

【专利技术属性】
技术研发人员：里程，郭镭，
申请(专利权)人：圣释北京生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：