表达模块、重组质粒、重组菌株及其应用制造技术

本发明专利技术涉及生物工程领域，尤其涉及表达模块、重组质粒、重组菌株及其应用。本发明专利技术提供了如下任意项在生产和/或制备7‑脱氢胆固醇中的应用；(I)、外源基因的表达；和/或(II)、内源基因的过表达和/或敲除。本发明专利技术提供了用于高效合成7‑DHC解脂耶氏酵母细胞工厂，确定了最佳的生产培养基，以及实现了从废弃脂质原料中高效合成7‑DHC，为未来大规模7‑DHC生物生产铺平了道路。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物工程领域，尤其涉及表达模块、重组质粒、重组菌株及其应用。

技术介绍

1、维生素d3(vd3)是一种脂溶性维生素，属于人类生长、生命和维持健康所需的类固醇激素家族，而vd3可以通过紫外线照射由7-脱氢胆固醇(7-dhc)合成。工业上通常以羊毛脂为原料，通过酯化、烯丙基氧化、还原、水解和消除反应可以合成7-dhc，该过程需要添加大量的有机试剂，容易对环境造成污染。此外，反应过程中温度和压力的变化可能会产生各种副产物。相比之下，通过微生物发酵合成7-dhc由于副产物较少、良好的可持续性和环境保护而更具吸引力。

2、解脂耶氏酵母被美国食品和药物管理局(fda)视为安全酵母，用于生产包括功能性脂质在内的增值化合物，琥珀酸、β-胡萝卜素、虾青素和芳香族聚酮化合物。与酿酒酵母相比，解脂耶氏酵母由于其对脂质底物的高效利用而显示出更好的工业应用前景。作为一种产油酵母，解脂耶氏酵母具有成熟的脂质代谢途径。特别是，解脂耶氏酵母本身具有内源甲羟戊酸途径，参与角鲨烯的生物合成，角鲨烯是7-dhc的重要前体。

3、由于合成生物学和代谢工程的快本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.如下任意项在生产和/或制备7-脱氢胆固醇中的应用；

2.核酸分子，其特征在于，包括：DHCR24基因；

3.质粒，其特征在于，包括：如权利要求2所述的核酸分子。

4.如权利要求3所述的质粒，其特征在于，还包括：敲除ERG5基因和/或ERG6基因。

5.宿主，其特征在于，转化和/或转染如权利要求3或4所述的质粒。

6.表达模块，其特征在于，包括：启动子、内源基因和终止子；

7.如权利要求6所述的表达模块，其特征在于，所述启动子包括：Php8d、PFBA1in、PEXP1和PTEF1in中的任意一种；

8...

【技术特征摘要】

1.如下任意项在生产和/或制备7-脱氢胆固醇中的应用；

2.核酸分子，其特征在于，包括：dhcr24基因；

3.质粒，其特征在于，包括：如权利要求2所述的核酸分子。

4.如权利要求3所述的质粒，其特征在于，还包括：敲除erg5基因和/或erg6基因。

5.宿主，其特征在于，转化和/或转染如权利要求3或4所述的质粒。

6.表达模块，其特征在于，包括：启动子、内源基因和终止子；

7.如权利要求6所述的表达模块，其特征在于，所述启动子包括：php8d、pfba1in、pexp1和ptef1in中的任意一种；

8.重组质粒，其特征在于，包括：如权利要求6或7所述的表达模块。

9.菌株，其特征在于，将如权利要求8所述的重组质粒转化和/或转染如权利要求5所述的宿主。

10.表达质粒，其特征在于，包括：平流芽孢杆菌来源的lip2基因和/或dga1；

11.重组菌株，其特征在于，将如权利要求10所述的表达质粒转化和/或转染如权利要求9所述的菌株。

12.产品，其特征在于，包括：如权利要求2所述的核酸分子、如权利要求3或4所述的质粒、如权利要求5...

【专利技术属性】
技术研发人员：元英进，董天宇，肖文海，姚明东，王颖，周晓，咸良，李霞，
申请(专利权)人：天津大学合成生物前沿研究院，
类型：发明
国别省市：