一种表达尿酸氧化酶的环状RNA、制备方法及应用技术

本发明专利技术属于分子生物学领域，具体涉及一种表达尿酸氧化酶的环状RNA、制备方法及应用。本发明专利技术首先提供了表达尿酸氧化酶的环状RNA载体，所述载体经过一步转酯反应即可在体外转录形成带有重组尿酸氧化酶基因的环状RNA，将所述环状RNA经过LNP包封后施用于哺乳动物可以显著增加哺乳动物体内尿酸氧化酶的表达水平，能够降低尿酸含量，具有良好的降尿酸活性；同时在血清中未检测到明显的尿酸酶抗尿酸氧化酶抗体，显示出药物具有用药后，长期的安全性和有效性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子生物学，具体涉及一种表达尿酸氧化酶的环状rna、制备方法及应用。

技术介绍

1、尿酸是人体代谢嘌呤的产物，而嘌呤代谢障碍会导致尿酸积累过量，引起血液中尿酸浓度增高，引发高尿酸症。高尿酸血症已经成为目前危害人类健康的常见疾病，发病率也越来越高，长期的高尿酸血症造成的尿酸盐结石会进一步诱发痛风。而且高尿酸血症也是心脑血管疾病、慢性肾病、动脉粥样硬化的危险因素，严重危害人类健康，因此高尿酸血症的治疗引起了人们的高度重视。

2、目前治疗高尿酸血症的药物主要有黄嘌呤氧化酶抑制剂别(嘌呤醇)、促尿酸排泄药物(苯溴马隆)等。丙磺舒、苯溴马隆等药物可以干扰肾小管对尿酸的重吸收，促进尿酸的排泄，但是对人体肾脏的损伤巨大，容易引发肾结石等肾病的发生；别嘌呤醇等药物通过抑制黄嘌呤氧化酶活性，阻断尿酸的产生来降低尿酸，但是又增加了肾脏排泄尿酸前体的负荷，而且容易引发黄嘌呤肾病和结石。目前，高尿酸血症已被列为心血管疾病的独立风险因素。因此，寻找有效的治疗手段势在必行。

3、尿酸氧化酶又称尿酸酶，是生物体内嘌呤降解代谢途径中的一种酶，大部分生本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种表达尿酸氧化酶的环状RNA，其特征在于，所述环状RNA的结构式如下式(Ⅰ)所示：

2.如权利要求1所述的环状RNA，其特征在于，所述尿酸氧化酶的氨基酸序列如SQE IDNO.1-7任一所示。

3.如权利要求1所述的环状RNA，其特征在于，所述尿酸氧化酶选自SQE ID NO.7所示的猪-狒狒嵌合体尿酸氧化酶，所述猪-狒狒嵌合体尿酸氧化酶的CDS序列如SEQ ID NO.8所示。

4.如权利要求1所述的环状RNA，其特征在于，所述信号肽元件选自IL2分泌信号肽、HLA分泌信号肽、LRG1分泌信号肽、CHRNA1分泌信号肽、APOB分泌信号肽、CS...

【技术特征摘要】

1.一种表达尿酸氧化酶的环状rna，其特征在于，所述环状rna的结构式如下式(ⅰ)所示：

2.如权利要求1所述的环状rna，其特征在于，所述尿酸氧化酶的氨基酸序列如sqe idno.1-7任一所示。

3.如权利要求1所述的环状rna，其特征在于，所述尿酸氧化酶选自sqe id no.7所示的猪-狒狒嵌合体尿酸氧化酶，所述猪-狒狒嵌合体尿酸氧化酶的cds序列如seq id no.8所示。

4.如权利要求1所述的环状rna，其特征在于，所述信号肽元件选自il2分泌信号肽、hla分泌信号肽、lrg1分泌信号肽、chrna1分泌信号肽、apob分泌信号肽、cst5分泌信号肽、galc分泌信号肽、gsn分泌信号肽、gp1ba分泌信号肽、gzmb分泌信号肽、serping1分泌信号肽、il12a分泌信号肽、il10分泌信号肽、il1rl1分泌信号肽、insr分泌信号肽、kir2dl1分泌信号肽、klk14分泌信号肽、lacrt分泌信号肽、lag3分泌信号肽中的任一种；所述分泌信号肽的氨基酸序列分别如seq idno.9-27所示。

5.如权利要求1所述的环状rna，其特征在于，所述ires元件选自以下的ires序列：taura综合征病毒、吸血猎蝽病毒、泰累尔氏脑脊髓炎病毒、猿猴病毒40、红火蚁病毒1、禾谷缢管蚜病毒、网状内皮增生症病毒、福曼脊髓灰质炎病毒1、大豆尺蠖病毒、克什米尔蜂病毒、人鼻病毒2、琉璃叶蝉病毒-1、人免疫缺陷病毒1型、琉璃叶蝉病毒-1、虱p病毒、丙型肝炎病毒、甲型肝炎病毒、gb型肝炎病毒、口蹄疫病毒、人肠道病毒71、马鼻病毒、茶尺蠖样病毒、脑心肌炎病毒(emcv)、果蝇c病毒、十字花科烟草病毒、蟋蟀麻痹病毒、牛病毒性腹泻病毒1、黑皇后细胞病毒、蚜虫致死麻痹病毒、禽脑脊髓炎病毒、急性蜂麻痹病毒、芙蓉枯黄环斑病毒、猪瘟病毒、人类fgf2、人类sftpa1、人类amll/runxl、果蝇触角足、人类aqp4、人类at1r、人类bag-1、人类bcl2、人类bip、人类c-iapl、人类c-myc、人类eif4g、小鼠ndst4l、人类lef1、小鼠hif1α、人类n.myc、小鼠gtx、人类p27kipl、人类pdgf2/c-sis、人类p53、人类pim-1、小鼠rbm3、果蝇reaper、犬scamper、果蝇ubx、唾液病毒、柯萨病毒、双埃柯病毒、人类unr、小鼠utra、人类vegf-a、人类xiap、果蝇hairless、酿酒酵母tfiid、酿酒酵母yap1、人类c-src、人类fgf-1、猿猴小核糖核酸病毒、芜菁绉缩病病毒、eif4g的适体、柯萨奇病毒a(cvb1/2)或柯萨奇病毒b3(cvb3)、核糖体识别基序pires1-10；所述pires1-10的序列分别如seqid no.28-37任一所示。

6.如权利要求1所述的环状rna，其特征在于，所述intron为鱼腥藻属pre-trnaleu基因内含子片段；所述e2为鱼腥藻属pre-trnaleu基因内含子片段下游的exon序列；所述e1为鱼腥藻属pre-trnaleu基因内含子片段上游的exon序列。

7.如权利要求6所述的环状rna，其特征在于，所述intron序列如seq id no.39所示；所述e2序列如seq id no.40-47任一所示；所述e1序列如seq id no.48-55任一所示。

8.一种表达权利要求1-7任一所述环状rna的重组核酸分子，所述重组核酸分子包含彼此可操作连接的并按以下顺序排列的元件：

9.如权利要求8所述的重组核酸分子，其特征在于，所述intron元件前还包括启动子元件，所述启动子元件启动所述重组核酸分子的体...

【专利技术属性】
技术研发人员：戴东升，卫帅，单琳，戴紫琳，
申请(专利权)人：优环苏州生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：