一种促进ips细胞定向分化为NK细胞的方法技术

本发明专利技术公开了一种促进ips细胞定向分化为NK细胞的方法，包括以下步骤：取iPSCs细胞，用第一诱导培养基制成单细胞悬液，接种至细胞板，离心，细胞培养箱内培养；步骤(1)培养7～10天后，更换为第二诱导培养基，将拟胚体转移至细胞板上培养；步骤(1)培养2～3天后在第一诱导培养基中加入Foxy‑5、GW788388中的一种或两种；或者第二诱导培养基中添加IL‑3、十二肽ASFLGSPGMPPF中的一种或两种。本发明专利技术开发了更有效的诱导ips细胞定向分化为NK细胞的方法，所得NK细胞表面激活性受体高表达，抑制性受体低表达，对靶细胞的杀伤率显著提高，对K‑562的杀伤率达到90％以上。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医药，特别涉及一种促进ips细胞定向分化为nk细胞的方法。

技术介绍

1、自然杀伤细胞(即nk细胞)是重要的免疫细胞，能对体内存在的肿瘤细胞做出快速反应，并参与抗肿瘤免疫。nk细胞在抗肿瘤免疫治疗中具有许多优点。首先，nk细胞无需预先致敏，不受主要组织相容性复合体(mhc)限制。其次，nk细胞不会引发移植物抗宿主病，还可用于肿瘤起始细胞cics的靶向治疗。此外，nk细胞易于体外分离和扩增。

2、nk细胞可以来源于人外周血(pb)、脐带血(ucb)、人胚胎干细胞(hescs)、诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells，ipscs)。不同来源的nk细胞具有不同的特性，pb来源的nk细胞有多种激活受体，如cd16、nkp44、nkp46和kirs，且无需放射治疗。然而，外周血中只有5-15％的淋巴细胞是nk细胞，且分离困难，纯度低。ucb虽含有高比例的nk细胞，但ucb-nk细胞表达成熟度较低。ipsc来源的nk细胞已被证明有效。相比pb-nk细胞与ucb-nk，ipsc-nk细胞具有高扩增及体外分化本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种促进ips细胞定向分化为NK细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)培养2～3天后在第一诱导培养基中加入5～8μmol/L Foxy-5、5～8μmol/LGW788388中的一种或两种；或者步骤(2)第二诱导培养基中添加5～9ng/mL IL-3、25～35μmol/L十二肽H2N-ASFLGSPGMPPF-OH中的一种或两种。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)培养2～3天后在第一诱导培养基中加入5～8μmol/L Foxy-5和、5～8μmol/LGW788388；步骤(2)第二诱...

【技术特征摘要】

1.一种促进ips细胞定向分化为nk细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)培养2～3天后在第一诱导培养基中加入5～8μmol/l foxy-5、5～8μmol/lgw788388中的一种或两种；或者步骤(2)第二诱导培养基中添加5～9ng/ml il-3、25～35μmol/l十二肽h2n-asflgspgmppf-oh中的一种或两种。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)培养2～3天后在第一诱导培养基中加入5～8μmol/l foxy-5和、5～8μmol/lgw788388；步骤(2)第二诱导培养基中添加5～9ng/ml il-3和25～35μmol/l十二肽h2n-asflgspgmppf-oh。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)培养2～3天后在第一诱导培...

【专利技术属性】
技术研发人员：齐国光，湛振键，李俊，李妖绕，郑世鑫，蔡秋雨，孟艳芬，
申请(专利权)人：海口健康岛生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：