一种促进ips细胞定向分化为NK细胞的方法技术

技术编号:42101672 阅读:18 留言:0更新日期:2024-07-25 00:27
本发明专利技术公开了一种促进ips细胞定向分化为NK细胞的方法,包括以下步骤:取iPSCs细胞,用第一诱导培养基制成单细胞悬液,接种至细胞板,离心,细胞培养箱内培养;步骤(1)培养7~10天后,更换为第二诱导培养基,将拟胚体转移至细胞板上培养;步骤(1)培养2~3天后在第一诱导培养基中加入Foxy‑5、GW788388中的一种或两种;或者第二诱导培养基中添加IL‑3、十二肽ASFLGSPGMPPF中的一种或两种。本发明专利技术开发了更有效的诱导ips细胞定向分化为NK细胞的方法,所得NK细胞表面激活性受体高表达,抑制性受体低表达,对靶细胞的杀伤率显著提高,对K‑562的杀伤率达到90%以上。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医药,特别涉及一种促进ips细胞定向分化为nk细胞的方法。


技术介绍

1、自然杀伤细胞(即nk细胞)是重要的免疫细胞,能对体内存在的肿瘤细胞做出快速反应,并参与抗肿瘤免疫。nk细胞在抗肿瘤免疫治疗中具有许多优点。首先,nk细胞无需预先致敏,不受主要组织相容性复合体(mhc)限制。其次,nk细胞不会引发移植物抗宿主病,还可用于肿瘤起始细胞cics的靶向治疗。此外,nk细胞易于体外分离和扩增。

2、nk细胞可以来源于人外周血(pb)、脐带血(ucb)、人胚胎干细胞(hescs)、诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,ipscs)。不同来源的nk细胞具有不同的特性,pb来源的nk细胞有多种激活受体,如cd16、nkp44、nkp46和kirs,且无需放射治疗。然而,外周血中只有5-15%的淋巴细胞是nk细胞,且分离困难,纯度低。ucb虽含有高比例的nk细胞,但ucb-nk细胞表达成熟度较低。ipsc来源的nk细胞已被证明有效。相比pb-nk细胞与ucb-nk,ipsc-nk细胞具有高扩增及体外分化本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种促进ips细胞定向分化为NK细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)培养2~3天后在第一诱导培养基中加入5~8μmol/L Foxy-5、5~8μmol/LGW788388中的一种或两种;或者步骤(2)第二诱导培养基中添加5~9ng/mL IL-3、25~35μmol/L十二肽H2N-ASFLGSPGMPPF-OH中的一种或两种。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)培养2~3天后在第一诱导培养基中加入5~8μmol/L Foxy-5和、5~8μmol/LGW788388;步骤(2)第二诱...

【技术特征摘要】

1.一种促进ips细胞定向分化为nk细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)培养2~3天后在第一诱导培养基中加入5~8μmol/l foxy-5、5~8μmol/lgw788388中的一种或两种;或者步骤(2)第二诱导培养基中添加5~9ng/ml il-3、25~35μmol/l十二肽h2n-asflgspgmppf-oh中的一种或两种。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)培养2~3天后在第一诱导培养基中加入5~8μmol/l foxy-5和、5~8μmol/lgw788388;步骤(2)第二诱导培养基中添加5~9ng/ml il-3和25~35μmol/l十二肽h2n-asflgspgmppf-oh。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)培养2~3天后在第一诱导培...

【专利技术属性】
技术研发人员:齐国光湛振键李俊李妖绕郑世鑫蔡秋雨孟艳芬
申请(专利权)人:海口健康岛生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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