【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种基于柔性纳米磁链的胞外囊泡糖基化肽段富集方法。
技术介绍
1、糖基化是重要的蛋白翻译后修饰之一，约50％以上的蛋白会发生糖基化形成糖蛋白。根据糖链与蛋白质的连接方式不同，蛋白质的糖基化主要分为n-糖基化、o-糖基化、c-糖基化和糖基磷脂酰肌醇锚定4大类型，其中n-糖基化和o-糖基化的研究最为广泛。目前应用于临床检测的多种肿瘤生物标志物大多属于糖蛋白，如肝癌诊断标志物甲胎蛋白，卵巢癌诊断标志物ca125等。胞外囊泡的膜蛋白主要为糖蛋白，含有丰富的糖链信息，在胞外囊泡的生物合成、生理和病理等方面发挥重要作用。基于质谱的蛋白质组学为深入全面解析蛋白质以及糖基化修饰提供了非常好的技术手段。
2、胞外囊泡的糖蛋白丰度非常低，蛋白酶解液中只有2～5％的肽段为糖基化肽段，分析蛋白质糖基化仍具有非常大的挑战。糖基化肽段的富集能够显著减少样品的复杂性，减少非糖基化肽段对糖基化肽段谱图解析的干扰，是影响质谱鉴定结果的主要原因。现有糖基化肽段的富集方法主要包括硼酸化学法、酰肼化学法和亲水作用色谱法。硼酸化学法主要利用硼酸基团与糖...
【技术保护点】
1.一种基于柔性纳米磁链的胞外囊泡糖基化肽段富集方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的胞外囊泡糖基化肽段富集方法，其特征在于：步骤(1)中，所述柔性纳米磁链以呈线形排列的磁性纳米粒子为内核，在呈线形排列的磁性纳米粒子外包覆有穿膜肽修饰的聚合物壳层。
3.根据权利要求2所述的胞外囊泡糖基化肽段富集方法，其特征在于：所述柔性纳米磁链长度在2μm～80μm之间；所述磁性纳米粒子为四氧化三铁纳米颗粒；所述聚合物壳层为修饰有穿膜肽功能基团的聚丙烯酸壳层。
4.根据权利要求2所述的胞外囊泡糖基化肽段富集方法，其特征在于：所述...
【技术特征摘要】
1.一种基于柔性纳米磁链的胞外囊泡糖基化肽段富集方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的胞外囊泡糖基化肽段富集方法，其特征在于：步骤(1)中，所述柔性纳米磁链以呈线形排列的磁性纳米粒子为内核，在呈线形排列的磁性纳米粒子外包覆有穿膜肽修饰的聚合物壳层。
3.根据权利要求2所述的胞外囊泡糖基化肽段富集方法，其特征在于：所述柔性纳米磁链长度在2μm～80μm之间；所述磁性纳米粒子为四氧化三铁纳米颗粒；所述聚合物壳层为修饰有穿膜肽功能基团的聚丙烯酸壳层。
4.根据权利要求2所述的胞外囊泡糖基化肽段富集方法，其特征在于：所述柔性纳米磁链采用如下方法制备而成，制备步骤如下：
5.根据权利要求4所述的胞外囊泡糖基化肽段富集方法，其特征在于：步骤(1)中，所述单体为丙烯酸、甲基丙烯酸或2-羟丙基丙烯酸中的一种；交联剂为乙二醇二甲基丙烯酸酯、二甲基丙烯酰胺或亚甲基双丙烯酰胺中的一种；引发剂为2-羟基-2-甲基丙苯酮。
6.根据权利要求4所述的胞外囊泡糖基化肽段富集方法，其特征在于：步骤(1)中，磁场强度为100～600gas，磁...
【专利技术属性】
技术研发人员：谢卓颖，李铭洋，丁强，钱嘉怡，孙杰，郭雪江，顾忠泽，
申请(专利权)人：东南大学，
类型：发明
国别省市：
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