利用假病毒模型制备高滴度重组流感病毒方法及其应用技术

本发明专利技术提供了利用假病毒模型制备高滴度重组流感病毒方法及其应用，高滴度的流感病毒制备疫苗可有效的缩短疫苗制备的周期和降低疫苗制备的成本。具体地，本发明专利技术提供了将低滴度H5亚型流感病毒改造为高滴度H5亚型流感病毒的方法，在实例中，通过本发明专利技术的方法，低滴度的A/blackbird/Hunan/1/2004的病毒被改造后，其滴度显著提高，免疫原性影响较小。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药领域，涉及利用假病毒模型制备高滴度重组流感病毒方法及其应用。

技术介绍

1、流感病毒(influenza virus)属于正粘病毒科，感染宿主主要包括禽类、人类和哺乳动物，会引发季节性流感和禽流感。季节性流感每年在全球范围内都会造成人员伤亡，且每隔几十年就会出现全球性流感大流行，对经济和社会都造成了极大的影响。据流感病毒膜蛋白1(m1)和核蛋白(np)抗原性的不同分为a、b、c、d四型。根据血细胞凝集素(ha)和神经氨酸酶(na)的不同，a型流感病毒分为18种ha亚型和11种na亚型。a型流感病毒呈球形，由包含ha、na和膜蛋白(m2)的磷脂双分子层构成病毒外壳，基因组是由8个分节段的单负链rna组成，主要编码11种病毒蛋白。

2、禽流感病毒根据致病性的差异可分为高致病性禽流感和低致病性禽流感，h5n1属于高致病性禽流感。禽类是h5n1高致病性禽流感的天然宿主，但已有研究证明h5n1流感病毒可突破种间屏障在不同物种间传播，甚至在人和人之间传播，一旦流行就会严重威胁公共卫生安全。当某一禽类种群中出现h5n1禽流感病例，种群中本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种将H5亚型低滴度流感病毒改造为高滴度流感病毒的方法，其特征在于，包括：

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括对参照用H5亚型低滴度流感病毒的病毒滴度的检测步骤。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述H5亚型低滴度病毒株突变的氨基酸为遗传进化树上与低滴度的H5亚型流感病毒株遗传距离最近的高滴度的H5亚型流感病毒株同位点的氨基酸。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述遗传距离最近的H5亚型高滴度的流感病毒株是指所述遗传进化树上与H5亚型低滴度的流感病毒株位于同一个结点、同一进化支的病毒株。>

5.如权利要...

【技术特征摘要】

1.一种将h5亚型低滴度流感病毒改造为高滴度流感病毒的方法，其特征在于，包括：

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括对参照用h5亚型低滴度流感病毒的病毒滴度的检测步骤。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述h5亚型低滴度病毒株突变的氨基酸为遗传进化树上与低滴度的h5亚型流感病毒株遗传距离最近的高滴度的h5亚型流感病毒株同位点的氨基酸。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述遗传距离最近的h5亚型高滴度的流感病毒株是指所述遗传进化树上与h5亚型低滴度的流感病毒株位于同一个结点、同一进化支的病毒株。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述h5亚型高滴度流感病毒是指对应的假病毒的相对荧光素酶活性(relative luciferase activity，rla)数值显著高于1000。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述h5亚型低滴度流感病毒是指对应的假病毒的相对荧光素酶活性(relative luciferase activity，rla)数值显著低于500。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述h5...

【专利技术属性】
技术研发人员：王桂芹，王海坤，常小艳，卢洪洲，张国良，刘冬平，
申请(专利权)人：中科南京生命健康高等研究院，
类型：发明
国别省市：