一种内切型褐藻胶裂解酶及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种内切型褐藻胶裂解酶AlgC2m及其应用。本发明专利技术所涉及的生物酶来源于一种海边土壤样本中富集的的类芽孢杆菌。本发明专利技术还公开了包含褐藻胶裂解酶AlgC2m基因的重组表达载体和重组宿主。本发明专利技术克隆得到新的褐藻胶裂解酶基因AlgC2m，大小1320bp，编码439个氨基酸，蛋白质分类归为PL‑7家族，与同家族的褐藻胶裂解酶相似度仅为38％。本发明专利技术提供的褐藻胶裂解酶AlgC2m具有降解海藻酸钠制备褐藻寡糖的功能，降解主产物为不饱和褐藻二、三糖，具有一定的工业化应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程，具体涉及一种内切型褐藻胶裂解酶及其应用。

技术介绍

1、海洋多糖是源于海洋的具有多种生理活性的生物大分子,因其具有抗肿瘤、抗氧化、抗病毒和免疫调节等功能，目前已广泛应用于医药、食品、化工、农业和环境等多个领域。然而,由于多糖的溶解性较差,多糖的生物利用度也较低,这大大限制了多糖的进一步应用。海洋功能寡糖是多糖通过物理、化学或酶解方法处理后得的降解产物,在保留多糖的多种活性的同时,寡糖的溶解性和生物利用率得到很大提高。因此,海洋功能寡糖已成为海洋生物资源开发领域的研究热点(刘航,天然产物研究与开发,2012,24:201-204)。

2、褐藻胶裂解酶通过β-消除非还原端的1,4-o-糖苷来催化褐藻胶的降解，得到在非还原端c-4和c-5之间形成双键的褐藻寡糖。根据碳水化合物活性酶(cazy)数据库，褐藻胶裂解酶属于pl家族5、6、7、14、15、17和18。根据底物的特异性，褐藻胶裂解酶可以进一步分为两类，一类是特异性降解古罗糖醛酸片段的裂解酶(polyg lyases，ec 4.2.2.11)，另一类是特异性降解甘露糖醛酸本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种褐藻胶裂解酶，其特征在于：其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.编码权利要求1所述褐藻胶裂解酶的基因。

3.如权利要求2所述的基因，其特征在于：其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

4.包含编码权利要求1所述褐藻胶裂解酶基因的表达载体。

5.如权利要求4所述的表达载体，其特征在于：所述表达载体为pET-22b(+)。

6.一种褐藻胶裂解酶的制备方法，其特征在于：包括采用权利要求4所述的表达载体转化寄主细胞，培养转化体，从培养物中获得重组褐藻胶裂解酶。

7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于...

【技术特征摘要】

1.一种褐藻胶裂解酶，其特征在于：其氨基酸序列如seq id no.1所示。

2.编码权利要求1所述褐藻胶裂解酶的基因。

3.如权利要求2所述的基因，其特征在于：其核苷酸序列如seq id no.2所示。

4.包含编码权利要求1所述褐藻胶裂解酶基因的表达载体。

5.如权利要求4所述的表达载体，其特征在于：所述表达载体为pet-22b(+)。

6.一种褐藻胶裂解酶的制备方法，其特征在于：包括采用权利要求4所述的表达载体转化寄主细胞，培养转化体，从培养物中获得重组...

【专利技术属性】
技术研发人员：钦松，李辉梅，吴斌，何冰芳，储建林，
申请(专利权)人：南京工业大学，
类型：发明
国别省市：