一种抗大口黑鲈虹彩病毒卵黄抗体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种抗大口黑鲈虹彩病毒卵黄抗体及其制备方法和应用。本发明专利技术的抗大口黑鲈虹彩病毒LMBV蛋白VP092卵黄抗体为利用在大肠杆菌中构建了的大口黑鲈虹彩病毒LMBV蛋白VP092亚单位疫苗，并通过纯化注射免疫产蛋鸡，收集所述免疫蛋鸡的鸡蛋，并从免疫鸡蛋卵黄中分离纯化得到。本发明专利技术分离、纯化得到纯度较高的抗大口黑鲈虹彩病毒LMBV蛋白VP092卵黄抗体，该抗体具有较强的中和大口黑鲈虹彩病毒LMBV活性，能够应用于制备预防及治疗大口黑鲈虹彩病毒LMBV感染引起的疾病。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，具体涉及一种抗大口黑鲈虹彩病毒卵黄抗体及其制备方法和应用。

技术介绍

1、大口黑鲈是重要的淡水养殖鱼类之一，因其生长迅速、营养高、肉质细嫩鲜美而在世界范围内广泛养殖。大口黑鲈虹彩病毒(largemouth bass virus，lmbv)是从患病大口黑鲈中分离到的病毒性病原，致死率高。lmbv是一种核质型双链dna病毒，隶属于虹彩病毒科蛙病毒属。lmbv感染大口黑鲈引起的典型症状包括烂身、体内外出血和脏器肿大等。近年来，大规模的lmbv感染在大口黑鲈的养殖中时有发生，造成了巨大的经济损失，并威胁大口黑鲈养殖业的健康发展。然而，目前尚未有治疗lmbv感染的有效药物。

2、卵黄抗体(immunoglobulin of yolk，igy)，亦称卵黄免疫球蛋白，是在特异性抗原刺激下由禽类b淋巴细胞产生并转移到卵黄中的多克隆抗体。目前，在水产动物养殖过程中抗生素的滥用不但导致动物产品药物残留，还增加了细菌对抗生素的抵抗力，寻找安全、高效的抗生素替代品迫在眉睫目前，卵黄抗体作为替代抗生素的新型饲料添加剂，正在引起人们的关注。卵黄抗体可从本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种抗大口黑鲈虹彩病毒LMBV蛋白VP092卵黄抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，抗原的制备具体为：以大口黑鲈虹彩病毒LMBV的蛋白VP092作为目标抗原蛋白，将蛋白VP092基因开放阅读框插入到载体pET-32α中，转化原核表达菌株BL21，构建重组表达蛋白VP092的工程菌；重组菌经过37℃温度诱导、洗涤、纯化溶解、复性和透析后纯度达到90％以上，收获纯化后的重组蛋白VP092，即得抗原。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，免疫蛋鸡具体为：将重组蛋白VP092对...

【技术特征摘要】

1.一种抗大口黑鲈虹彩病毒lmbv蛋白vp092卵黄抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，抗原的制备具体为：以大口黑鲈虹彩病毒lmbv的蛋白vp092作为目标抗原蛋白，将蛋白vp092基因开放阅读框插入到载体pet-32α中，转化原核表达菌株bl21，构建重组表达蛋白vp092的工程菌；重组菌经过37℃温度诱导、洗涤、纯化溶解、复性和透析后纯度达到90％以上，收获纯化后的重组蛋白vp092，即得抗原。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，免疫蛋鸡具体为：将重组蛋白vp092对蛋鸡进行三次免疫，每次选择胸肌下注射1ml，每次免疫间隔一周。第三次免疫后的一周开始收集鸡蛋。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，卵黄抗体的分离具体为：在收集鸡蛋的卵黄液中加入9倍体积的去离子水稀释，调节ph至5.0，于-20℃冰箱中冷冻过夜；解冻后离心收集上清,得到卵黄抗体粗提物。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：周胜，刘士佳，罗佳怡，王权，梁霞，秦启伟，宁运尚，梁增健，
申请(专利权)人：广州南沙华农渔业研究院，
类型：发明
国别省市：