【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
技术介绍
1、使用稀有切割(rare-cutting)核酸酶(诸如转录激活因子样效应物核酸酶(talen)、锌指核酸酶(zfn))的基因组编辑技术、成簇规律间隔短回文重复(crispr)以及相关的crispr相关蛋白9(cas9)或cpf1系统，加速了基础生物学研究、生物技术、育种和基因治疗。稀有切割核酸酶可用于生成缺失、插入和启动同源重组。talen包括稀有切割核酸酶和可靶向特定序列并在脱氧核糖核酸(dna)中生成精确断裂的tale。一种talen设计包括左半talen和右半talen，所述左半talen包括与识别第一结合位点后接间隔区的稀有切割核酸酶融合的左tale，所述右半talen包括与识别第二结合位点的稀有切割核酸酶融合的右tale。
技术实现思路
1、本公开涉及克服上述与tale相关的挑战和需求。
2、各种方面都涉及多种核苷酸序列，包括编码与第一转录激活因子样效应物(tale)的至少一部分融合的第一内含肽(intein)的第一核苷酸序列，编码与第二tale的至少一...
【技术保护点】
1.多种核苷酸序列，包括：
2.根据权利要求1所述的多种核苷酸序列，其中，所述第一核苷酸序列编码与所述第一TALE融合的所述第一内含肽，并且所述第二核苷酸序列编码与所述第二TALE融合的所述第一内含肽。
3.根据权利要求2所述的多种核苷酸序列，其中，所述第三核苷酸序列编码与所述稀有切割核酸酶融合的所述第二内含肽。
4.根据权利要求1所述的多种核苷酸序列，其中，所述第一核苷酸序列编码与所述稀有切割核酸酶的第一部分和所述第一TALE融合的所述第一内含肽，并且所述第二核苷酸序列编码与所述稀有切割核酸酶的第一部分和所述第二TALE融合的所述
...【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.多种核苷酸序列，包括：
2.根据权利要求1所述的多种核苷酸序列，其中，所述第一核苷酸序列编码与所述第一tale融合的所述第一内含肽，并且所述第二核苷酸序列编码与所述第二tale融合的所述第一内含肽。
3.根据权利要求2所述的多种核苷酸序列，其中，所述第三核苷酸序列编码与所述稀有切割核酸酶融合的所述第二内含肽。
4.根据权利要求1所述的多种核苷酸序列，其中，所述第一核苷酸序列编码与所述稀有切割核酸酶的第一部分和所述第一tale融合的所述第一内含肽，并且所述第二核苷酸序列编码与所述稀有切割核酸酶的第一部分和所述第二tale融合的所述第一内含肽。
5.根据权利要求4所述的多种核苷酸序列，其中，所述第三核苷酸序列编码与所述稀有切割核酸酶的第二部分融合的所述第二内含肽，其中，所述稀有切割核酸酶的第一部分和第二部分形成所述稀有切割核酸酶。
6.根据权利要求1所述的多种核苷酸序列，其中，所述多种核苷酸序列各自包括单独的载体和/或位于单个表达构建体上。
7.根据权利要求1所述的多种核苷酸序列，其中，所述第一内含肽和所述第二内含肽被配置成当接触时自剪接，并且作为响应，形成包括与所述稀有切割核酸酶结合的所述第一tale的第一半转录激活因子样效应物核酸酶(talen)。
8.根据权利要求7所述的多种核苷酸序列，其中，所述第一内含肽和所述第二内含肽被配置成当接触时自剪接，并且作为响应，形成包括与所述稀有切割核酸酶结合的所述第二tale的第二半talen。
9.根据权利要求1所述的多种核苷酸序列，其中，所述第一内含肽和所述第二内含肽被配置成在接触时自剪接，并形成包括与所述第二内含肽结合的所述第一内含肽的剪接蛋白。
10.根据权利要求1所述的多种核苷酸序列，其中，所述多种核苷酸序列中的每一个还编码启动子和终止子。
11.一种方法，包括：
12.根据权利要求11所述的方法，还包括翻译所述第一核苷酸序列、所述第二核苷酸序列和所述第三核苷酸序列，以形成与所述第一tale融合的所述第一内含肽、与所述第二tale融合的所述第一内含肽以及与所述稀有切割核酸酶融合的所述第二内含肽。
13.根据权利要求11所述的方法，还包括使用所述第一半talen和所述第二半talen转化所述细胞。
14.根据权利要求11所述的方法，其中，所述第一核苷酸序列编码与所述第一tale的c末端融合的n末端内含肽，所述第二核苷酸序列编码与所述第二tale的c末端融合的所述n末端内含肽，并且所述第三核苷酸序列编码与所述稀有切割核酸酶的n末端融合的c末端内含肽或在所述稀有...
【专利技术属性】
技术研发人员：罗伯特·W·威廉斯，萨拉·威尔森，
申请(专利权)人：希博斯欧洲有限公司，
类型：发明
国别省市：
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