一种基于非洲猪瘟pK205R检测IgM抗体的捕获ELISA试剂盒制造技术

本发明专利技术属于病毒检测技术领域，公开了一种基于非洲猪瘟pK205R检测IgM抗体的捕获ELISA试剂盒，本研究以兔抗猪IgM多抗为抗原，HRP酶标的ASFVpK205R为二抗，建立了ASFV IgM抗体的ELISA检测方法，该方法具有良好的特异性、较高的灵敏度。pK205R IgM抗体捕获ELISA检测方法的批内、批间变异系数分别为3.00％～9.18％、4.21％～9.42％，均小于10％，表明该方法具有良好重复性。检测319份田间血清样品IgM与IFA比较，敏感性与特异性分别是94.23％、98.13％，与IFA的符合率是97.49％。本发明专利技术为ASFV早期感染的快速诊断提供工具，对猪场的日常猪群健康监测、后备猪引种、精准剔除等生物安全防控具有重要现实意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及病毒检测，更具体的，涉及一种基于非洲猪瘟pk205r检测igm抗体的捕获elisa试剂盒。

技术介绍

1、非洲猪瘟(african swine fever，asf)是由非洲猪瘟病毒(african swine fevervirus，asfv)引起家猪和野猪的一种烈性传染病，目前尚无有效的治疗药物和商品化疫苗。

2、igm占血清球蛋白总量的5～10％，在b细胞表面以膜结合单体的形式表达，是b细胞抗原受体(bcr)的主要组成部分。igm抗体是一种具有强大结合抗原能力的抗体，比igg抗体更容易激活补体，是个体发育过程中最早合成的抗体，也是初始体液免疫反应中最早产生的抗体。检测到血清中有某种病毒的igm表明机体存在近期感染，在脐带血中高水平的igm表明宫内感染的可能性，因此，igm抗体的elisa检测方法可以成为早期检测传染病的重要诊断工具。

3、pk205r蛋白在不同分离株中高度保守，抗原性强，是一个早期病毒蛋白，在病毒感染4h后就开始大量表达，在细胞质中弥散分布，随后也出现在病毒工厂中，研究发现pk205r可以触发内质网应本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于非洲猪瘟pK205R检测IgM抗体的捕获ELISA试剂盒，其特征在于，所述试剂盒采用兔抗猪IgM多抗作为包被抗原，采用HRP酶标记的ASFVpK205R蛋白作为酶标抗体；

2.根据权利要求1所述的基于非洲猪瘟pK205R检测IgM抗体的捕获ELISA试剂盒，其特征在于，所述兔抗猪IgM多抗的制备中，首次免疫是将Native pig IgM与弗氏完全佐剂混合乳化，其余3次均与弗氏不完全佐剂混合乳化。

3.根据权利要求1所述的基于非洲猪瘟pK205R检测IgM抗体的捕获ELISA试剂盒，其特征在于，所述ASFVpK205R蛋白的制备方法包括以下步骤：...

【技术特征摘要】

1.一种基于非洲猪瘟pk205r检测igm抗体的捕获elisa试剂盒，其特征在于，所述试剂盒采用兔抗猪igm多抗作为包被抗原，采用hrp酶标记的asfvpk205r蛋白作为酶标抗体；

2.根据权利要求1所述的基于非洲猪瘟pk205r检测igm抗体的捕获elisa试剂盒，其特征在于，所述兔抗猪igm多抗的制备中，首次免疫是将native pig igm与弗氏完全佐剂混合乳化，其余3次均与弗氏不完全佐剂混合乳化。

3.根据权利要求1所述的基于非洲猪瘟pk205r检测igm抗体的捕获elisa试剂盒，其特征在于，所述asfvpk205r蛋白的制备方法包括以下步骤：

4.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：周沛，孔翠滢，陈慧，吴熠丹，张桂红，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：