【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物，具体为微生物二段发酵技术。
技术介绍
1、青钱柳[cyclocarya paliurus(batal.)iljinskaja]又名青钱李或摇钱树，是我国特有的单一品种的珍贵药食同源植物，属国家二级保护植物，被称为植物界的大熊猫，医学界的“第二棵树”。青钱柳在我国主要分布于亚热带季风气候的山区，包括江西、浙江、江苏、安徽等地。青钱柳的食用和药用价值高，树皮、树叶具有清热解毒、消肿止痛功能，民间常用其制成保健茶进行饮用，青钱柳叶被卫生和健康委员会列入新资源食品目录。现代研究表明，青钱柳叶中含有糖类、黄酮、萜类、蛋白质、矿物质、酚酸类、维生素和皂苷等多种重要物质，其中黄酮(flavonoids)和多糖(polysaccharides)类物质为青钱柳主要的功能性成分。黄酮类物质具有抗癌、抗肿瘤、防衰老、预防心脑血管疾病和调节机体免疫等功效，而多糖类物质则被报道具有降血糖功能。
技术实现思路
1、本项目致力于通过高效联合提取、纯化集成技术制备这类林源药食同源植物活性成分，开发具有相应功能的食品、保健食品、药品原料。
2、本文研究应用微生物二段发酵技术，利用两级微生物在生长代谢过程中所产生的生物酶类对青钱柳叶进行发酵作用，通过酶解反应提高青钱柳叶片细胞壁的通透性，使贮藏在叶片细胞中的多糖和黄酮类物质可以更好溶出，从而使发酵液中含量提升，达到破壁的效果，对提取效率进行了强化。
3、其提取工艺路线为：青钱柳叶粉-里氏木霉(接种1)-高温灭菌-枯草芽孢杆
4、有益效果
5、本文采用微生物二段发酵技术同步提取青钱柳叶中的多糖和黄酮，以单因素影响实验结果为基础，运用影响较大的因素设计正交实验，对微生物发酵的条件进行再次优化，从而得到最佳的提取工艺条件，使多糖和黄酮提取率有了较大提升。最佳的二段发酵工艺条件为：青钱柳叶粉以料液比为1：25(g/ml)与水进行混合，在121℃灭菌20min后冷却至室温；在第一段发酵时接种3％的里氏木霉种子液，培养箱参数为150r/min、温度为32℃下发酵12h；对一段发酵液进行121℃灭菌20min，并冷却至室温；第二段发酵过程，以5％接种量接入菌种比1：3(里氏木霉：枯草芽孢杆菌)的混合种子液于150r/min、32℃的培养箱条件下连续发酵提取2天，最终可得到青钱柳叶中多糖的提取率达7.62％，黄酮的提取率达到7.00％。较xie jh等学者的超声波提取多糖(提取率为4.91％)和董安强等的超声波辅助水醇提取黄酮(提取率为2.95％)等方法有较大幅度的提升。本研究的微生物二段发酵同步提取工艺，在一定程度上提高了青钱柳叶中的多糖和黄酮提取率，并进行对二者进行一同提取，而非分步提取，提升了青钱柳叶的利用率，减少了资源浪费。
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1.微生物二段发酵技术同步提取青钱柳叶中黄酮和多糖的工艺研究，其特征在于，提取工艺流程为：青钱柳叶粉-里氏木霉接种-高温灭菌-枯草芽孢杆菌、里氏木霉接种-发酵提取-过滤-测定。
2.根据权利要求1所述微生物二段发酵技术同步提取青钱柳叶中黄酮和多糖的工艺研究流程，其特征在于，包括：
3.根据权利要求2所述微生物二段发酵技术同步提取青钱柳叶中黄酮和多糖的工艺研究流程，其特征在于，步骤S1具体为：
4.根据权利要求2所述微生物二段发酵技术同步提取青钱柳叶中黄酮和多糖的工艺研究流程，其特征在于，步骤S2具体为：
5.根据权利要求2所述微生物二段发酵技术同步提取青钱柳叶中黄酮和多糖的工艺研究流程，其特征在于，步骤S3具体为：
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7.根据权利要求2所述微生物二段发酵技术同步提取青钱柳叶中黄酮和多糖的工艺研究流程，其特征在于，步骤S5具体为：
8.根据权利要求2所述微生物二段发酵技术同步提取青钱柳叶中
...【技术特征摘要】
1.微生物二段发酵技术同步提取青钱柳叶中黄酮和多糖的工艺研究，其特征在于，提取工艺流程为：青钱柳叶粉-里氏木霉接种-高温灭菌-枯草芽孢杆菌、里氏木霉接种-发酵提取-过滤-测定。
2.根据权利要求1所述微生物二段发酵技术同步提取青钱柳叶中黄酮和多糖的工艺研究流程，其特征在于，包括：
3.根据权利要求2所述微生物二段发酵技术同步提取青钱柳叶中黄酮和多糖的工艺研究流程，其特征在于，步骤s1具体为：
4.根据权利要求2所述微生物二段发酵技术同步提取青钱柳叶中黄酮和多糖的工艺研究流程，其特征在...
【专利技术属性】
技术研发人员：吕可，张春晓，郭建阳，姜育恒，奕嘉豪，胡鸿雨，林颖，邹文利，
申请(专利权)人：浙江师范大学行知学院，
类型：发明
国别省市：
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