表达元件、基因工程菌及N-乙酰神经氨酸的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种表达元件、基因工程菌及N‑乙酰神经氨酸的制备方法。所述表达元件包含骨架质粒pRSFDuet、UDP‑N‑乙酰氨基葡萄糖差向异构基因neuC和唾液酸合酶基因neuB。本发明专利技术还公开了一种基因工程菌及N‑乙酰神经氨酸的制备方法。本发明专利技术提供的基因工程菌在N‑乙酰神经氨酸制备中提高了现有生物学方法生产N‑乙酰神经氨酸的产量，有着产量高的特点，具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程领域，具体涉及一种表达元件、基因工程菌及n-乙酰神经氨酸的制备方法。

技术介绍

1、唾液酸是具有九碳骨架的荷负电单糖家族，共有50余种，其中n-乙酰神经氨酸(nana、neunac、neu5ac)是较丰富的种类之一，它最初由颌下腺粘蛋白中分离而出，也因此而得名唾液酸(sialic acid，简称sa)。唾液酸广泛存在于脊椎动物和高等无脊椎动物体内细胞膜糖蛋白和脂蛋白中，通常以低聚糖，糖脂或者糖蛋白的形式存在。

2、天然唾液酸主要来源于母乳、牛奶、鸡蛋、奶酪和燕窝，但含量较低；目前其生产方法主要包括天然产物抽提法、化学合成法、生物酶法和微生物发酵法。如n-乙酰甘露糖胺和α-(溴甲基)丙烯酸在酸性醇溶液中铟的催化下化学合成n-乙酰神经氨酸，该反应条件严苛，易造成环境污染；全细胞生物酶法以丙酮酸和乙酰氨基葡萄糖为原料，价格昂贵，且神经氨酸醛缩酶催化会可逆分解，反应结束后残留大量的丙酮酸致使产物分离遇到困难，转化率低，生产成本高。近年来，运用合成生物学方法生产天然产物成为热点之一，因此利用廉价易得的葡萄糖作为直接发酵原料生产n-乙本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种表达元件，其特征在于，所述表达元件包含骨架质粒pRSFDuet、UDP-N-乙酰氨基葡萄糖差向异构基因neuC和唾液酸合酶基因neuB。

2.如权利要求1所述的表达元件，其特征在于，所述表达元件中的基因满足以下条件中的一种或两种：

3.如权利要求1或2所述的表达元件，其特征在于，所述UDP-N-乙酰氨基葡萄糖差向异构基因neuC与唾液酸合酶基因neuB由一个共同的启动子调控或分别由两个或多个启动子调控；

4.如权利要求1-3中任一项所述的表达元件，其特征在于，所述表达元件还包含谷氨酰胺合成酶基因glnA；

5.一种基因工程菌，其特征...

【技术特征摘要】

1.一种表达元件，其特征在于，所述表达元件包含骨架质粒prsfduet、udp-n-乙酰氨基葡萄糖差向异构基因neuc和唾液酸合酶基因neub。

2.如权利要求1所述的表达元件，其特征在于，所述表达元件中的基因满足以下条件中的一种或两种：

3.如权利要求1或2所述的表达元件，其特征在于，所述udp-n-乙酰氨基葡萄糖差向异构基因neuc与唾液酸合酶基因neub由一个共同的启动子调控或分别由两个或多个启动子调控；

4.如权利要求1-3中任一项所述的表达元件，其特征在于，所述表达元件还包含谷氨酰胺合成酶基因glna；

5.一种基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌包含如权利要求1-4中任一项所述的表达元件。

6.如权利要求5所述的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌中的n-乙酰神经...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴燕，唐静，王舒，田振华，
申请(专利权)人：弈柯莱生物科技集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：