【技术实现步骤摘要】
本申请涉及木豆内生真菌，尤其涉及一种木豆内生真菌及其应用。
技术介绍
1、木豆[cajanus cajan(l.)millsp]是世界上唯一的木本豆科植物，其药用功效显著，具有消肿、止血、消炎、止痛等疗效，是我国治疗股骨头坏死特效药“通络生骨胶囊”的唯一原料。相关药理活性研究表明木豆芪酸是木豆的主要功能活性成分，具有促进成骨细胞增殖、抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、抗炎、抗菌等多种药理活性，已成为众多新药、新先导化合物和新化学实体的重要来源。
2、木豆栽培种易受生境差异、土壤重金属、农药残留等诸多不利因素影响，且木豆芪酸含量极易受环境变化和病虫害等因素的影响，使得所获原料品质良莠不齐，已造成了相关医药制剂临床治疗效果不佳等后果。植物毛状根培养技术具有不受地域和季节限制、生长速度快、培养周期短、可基本保持母本的一切遗传特征、培养条件可人为控制、易于工厂化生产和自动化控制等优势，且能够克服传统植物组织培养体系对外源植物激素的高度依赖性，在实际应用中可显著降低生产成本，已成为高效生产次生代谢活性成分的重要技术手段。
3、内生真菌是植物内环境重要组成部分，可显著影响宿主植物次生代谢活性成分的生物合成与积累。近些年来，利用内生真菌作为生物诱导子增强植物组织培养体系中次生代谢活性成分的合成与积累，已成为科研人员普遍重视的方法。kumar等利用亚麻内生真菌诱导其毛状根培养体系，可使木酯素类活性成分含量显著增加。ming等利用丹参内生真菌诱导其毛状根培养体系，可使其丹参酮类活性成分含量大幅增加。pawar等利用海棠内生真菌诱导其
技术实现思路
1、本申请提供了一种木豆内生真菌及其应用，以解决现有木豆内生真菌诱导木豆毛状根中次生代谢活性成分增量技术空白的问题。
2、第一方面，本申请提供了一种木豆内生真菌，所述内生真菌分类命名为产红青霉(penicillium rubens)l-150，已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为cgmcc no.40850，保藏日期为2023年10月19日。
3、可选的，所述内生真菌从豆科木豆属植物木豆[cajanus cajan(l.)millsp]叶中分离得到。
4、第二方面，本专利技术还提供了一种第一方面中所述的木豆内生真菌的应用，所述木豆内生真菌具备产纤维素酶和木豆芪酸的能力，用于促进毛状根中木豆芪酸的积累。
5、可选的，所述木豆内生真菌用于促进毛状根中木豆芪酸的积累，包括以下步骤：
6、接种培养内生真菌l-150；
7、收集内生真菌l-150的活体菌丝诱导子；
8、将制备的内生真菌l-150活体菌丝诱导子添加到木豆毛状根液体培养体系，促进木豆芪酸的合成增量。
9、可选的，所述接种培养内生真菌l-150，具体包括：活化后的内生真菌l-150菌株接种于pda培养基上，在恒温培养7～10天。
10、可选的，所述木豆毛状根液体培养体系的制备过程包括以下步骤：
11、将木豆毛状根株系接种于1/2ms液体培养基中，培养基初始ph值为5.5～6.0，培养温度为27℃～30℃，蔗糖浓度为3％(w/v)，接种量为2％(w/v)，在120r/min～150r/min下摇床震荡培养。
12、可选的，所述木豆毛状根株系摇床震荡培养42天。
13、可选的，所述将制备的内生真菌l-150活体菌丝诱导子添加到木豆毛状根液体培养体系，具体包括：无菌条件下，将l-150活体菌丝诱导子添加至木豆毛状根液体培养体系中震荡共培养，其中菌丝加入量为0.5％～1％(w/v)。
14、可选的，菌丝加入量为0.75％(w/v)。
15、可选的，所述将l-150活体菌丝诱导子添加至木豆毛状根液体培养体系中震荡共培养，培养时间为24h。
16、本专利技术提供的上述技术方案与现有技术相比具有如下优点：
17、本专利技术提供了一种木豆内生真菌及其应用，从木豆叶中分离得到一种新的木豆内生真菌，该内生真菌l-150的活体菌丝可以显著诱导提高木豆毛状根中木豆芪酸的含量，实现体外高效生产木豆芪酸这一高价值活性成分，摆脱从自然资源中获取该活性成分的传统方式，为利用生物工程技术工业化生产木豆芪酸奠定了重要的理论和技术基础。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种木豆内生真菌，其特征在于，所述内生真菌分类命名为产红青霉(Penicilliumrubens)L-150，已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC NO.40850，保藏日期为2023年10月19日。
2.根据权利要求1所述的木豆内生真菌，其特征在于，所述内生真菌从豆科木豆属植物木豆[Cajanus cajan(L.)Millsp]叶中分离得到。
3.权利要求1～2任一所述的木豆内生真菌的应用，其特征在于，所述木豆内生真菌具备产纤维素酶和木豆芪酸的能力，用于促进毛状根中木豆芪酸的积累。
4.根据权利要求3所述的木豆内生真菌的应用，其特征在于，所述木豆内生真菌用于促进毛状根中木豆芪酸的积累，包括以下步骤：
5.根据权利要求4所述的木豆内生真菌的应用，其特征在于，所述接种培养内生真菌L-150，具体包括：活化后的内生真菌L-150菌株接种于PDA培养基上，在恒温培养7～10天。
6.根据权利要求4所述的木豆内生真菌的应用，其特征在于，所述木豆毛
7.根据权利要求6所述的木豆内生真菌的应用，其特征在于，所述木豆毛状根株系摇床震荡培养42天。
8.根据权利要求4所述的木豆内生真菌的应用，其特征在于，所述将制备的内生真菌L-150活体菌丝诱导子添加到木豆毛状根液体培养体系，具体包括：无菌条件下，将L-150活体菌丝诱导子添加至木豆毛状根液体培养体系中震荡共培养，其中菌丝加入量为0.5％～1％(W/V)。
9.根据权利要求8所述的木豆内生真菌的应用，其特征在于，菌丝加入量为0.75％(W/V)。
10.根据权利要求8所述的木豆内生真菌的应用，其特征在于，所述将L-150活体菌丝诱导子添加至木豆毛状根液体培养体系中震荡共培养，培养时间为24h。
...【技术特征摘要】
1.一种木豆内生真菌，其特征在于，所述内生真菌分类命名为产红青霉(penicilliumrubens)l-150，已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为cgmcc no.40850，保藏日期为2023年10月19日。
2.根据权利要求1所述的木豆内生真菌，其特征在于，所述内生真菌从豆科木豆属植物木豆[cajanus cajan(l.)millsp]叶中分离得到。
3.权利要求1～2任一所述的木豆内生真菌的应用，其特征在于，所述木豆内生真菌具备产纤维素酶和木豆芪酸的能力，用于促进毛状根中木豆芪酸的积累。
4.根据权利要求3所述的木豆内生真菌的应用，其特征在于，所述木豆内生真菌用于促进毛状根中木豆芪酸的积累，包括以下步骤：
5.根据权利要求4所述的木豆内生真菌的应用，其特征在于，所述接种培养内生真菌l-150，具体包括：活...
【专利技术属性】
技术研发人员：焦骄，盖庆岩，富锦先，付玉杰，
申请(专利权)人：东北林业大学，
类型：发明
国别省市：
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