一种植物样本核酸提取试剂盒及其使用方法技术

本发明专利技术涉及分子生物学检测领域，公开了一种植物样本核酸提取试剂盒及其使用方法，试剂盒包括辅助裂解液、裂解液、磁珠混合液、洗涤液和洗脱液，所述辅助裂解液包括异构十三醇聚氧乙烯醚和还原型谷胱甘肽。异构十三醇聚氧乙烯醚和还原型谷胱甘肽在体系中为体系提供了还原物质，提升体系的抗氧化能力；优化洗涤液，在洗涤液中加入醋酸钾；优化裂解液，提升了试剂盒的核酸提取效率和提取稳定性；核酸提取方法包括在裂解之前的辅助裂解步骤，在裂解前防止植物组织样本氧化，提升裂解效率。本发明专利技术的提取试剂盒和提取方法较现有技术具有更高的核酸提取浓度和核酸提取稳定性，适用于大豆、玉米、叶片等植物组织样本，和番茄、洋葱等果肉类样本。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子生物学检测领域，具体涉及一种植物样本核酸提取试剂盒及其使用方法。

技术介绍

1、本节中的陈述仅提供与本申请公开相关的背景信息，并且可能不构成现有技术。

2、核酸是由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物，为生命的最基本物质之一，核酸广泛存在于动植物细胞、微生物体内，生物体内的核酸常与蛋白质结合形成核蛋白。随着核酸分析技术的不断进步，高通量、高效率的磁珠法核酸提取技术，大大简化了dna/rna的分离过程，使得核酸提取过程更快、产物纯度更高，同时提高了检测灵敏度和准确性。

3、植物组织样本是较难提取的样本之一，提取植物样本时，经常遇到得率较低、纯度较差的情况，其主要难点在于：1、植物具有细胞壁结构，细胞壁由糖类和纤维素组成，裂解困难；2、植物体在新陈代谢过程中常积累有一些中间有机分子(如酚类、黄酮类、鞣质、蜡和其他次生代谢产物)，酚类代谢物在空气中易被氧化为醌类物质，醌类物质易与rna结合，导致rna活性丧失，同时其易与核酸和蛋白发生不可逆结合，使核酸失去活性，在提取过程中与蛋白及核酸共沉淀，形成不溶性化合物；多糖类代谢产本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种植物样本核酸提取试剂盒，其特征在于，包括辅助裂解液、裂解液、磁珠混合液、洗涤液和洗脱液，所述辅助裂解液包括异构十三醇聚氧乙烯醚和还原型谷胱甘肽。

2.根据权利要求1所述的一种植物样本核酸提取试剂盒，其特征在于，所述辅助裂解液包括质量百分含量为5％～10％异构十三醇聚氧乙烯醚、1.0％～2.0％还原型谷胱甘肽。

3.根据权利要求2所述的一种植物样本核酸提取试剂盒，其特征在于，辅助裂解液中异构十三醇聚氧乙烯醚的质量百分含量为5％、8％或10％，还原型谷胱甘肽的质量百分含量为1.0％、1.5％或2.0％。

4.根据权利要求1所述的一种植物样本核酸提取...

【技术特征摘要】

1.一种植物样本核酸提取试剂盒，其特征在于，包括辅助裂解液、裂解液、磁珠混合液、洗涤液和洗脱液，所述辅助裂解液包括异构十三醇聚氧乙烯醚和还原型谷胱甘肽。

2.根据权利要求1所述的一种植物样本核酸提取试剂盒，其特征在于，所述辅助裂解液包括质量百分含量为5％～10％异构十三醇聚氧乙烯醚、1.0％～2.0％还原型谷胱甘肽。

3.根据权利要求2所述的一种植物样本核酸提取试剂盒，其特征在于，辅助裂解液中异构十三醇聚氧乙烯醚的质量百分含量为5％、8％或10％，还原型谷胱甘肽的质量百分含量为1.0％、1.5％或2.0％。

4.根据权利要求1所述的一种植物样本核酸提取试剂盒，其特征在于，所述洗涤液包括体积分数为80％的乙醇，2m的醋酸钾。

5.根据权利要求1所述的一种植物样本核酸提取试剂盒，其特征在于，所述磁珠混合液包括磁珠和体积分数为20％的异丙醇溶液，所述磁珠为硅羟基修饰的磁珠，粒径大小为100-600nm，浓度为20mg/ml。

6.根据权利要求1所述的一...

【专利技术属性】
技术研发人员：李彤，牛明月，王颖颖，汪康游，李红东，李明，
申请(专利权)人：西安天隆科技有限公司，
类型：发明
国别省市：