用于真菌四重荧光定量PCR检测的引物组合物及试剂盒、应用制造技术

技术编号:41966329 阅读:19 留言:0更新日期:2024-07-10 16:48
本发明专利技术涉及一种用于真菌四重荧光定量PCR检测的引物组合物,包括扩增烟曲霉anxc4基因区的引物对、扩增毛霉rnl基因区的引物对、扩增荚膜组织胞浆菌Hcp100基因区的引物对、以及扩增镰刀菌Ef1α基因区的引物对。本发明专利技术还涉及包括上述引物组合物的试剂盒,且利用该试剂盒同时检测烟曲霉、毛霉、镰刀菌和荚膜组织胞浆菌时,特异性为100%,且灵敏度好,最低检出限达100拷贝/反应;由此,利用所述PCR检测引物组合物可以快速、方便、高效、特异且灵敏地检测出菌体、痰、血液、支气管肺泡灌洗液等待测样品中的烟曲霉、毛霉、镰刀菌和荚膜组织胞浆菌成分,对于临床上对烟曲霉、毛霉、镰刀菌和荚膜组织胞浆菌感染进行快速诊断具有非常重要的作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物检测,尤其涉及用于真菌四重荧光定量pcr检测的引物组合物及试剂盒、应用。


技术介绍

1、全球每年约有300万人发生慢性重度真菌感染,近190万患者会发展为急性侵袭性真菌病(invasis fungal disease,ifd),超过160万人死于ifd。近几十年来,免疫功能低下患者侵袭性真菌感染的频率和严重程度急剧增加,死亡率为30-90%,造成了重大的公共卫生负担。世界卫生组织于2022年发布了首份真菌病原体清单,根据病原体存在耐药性或其他治疗和管理挑战可能导致侵袭性急性和亚急性全身真菌感染的原则,将致病真菌病原体分为严重、高和中三个优先组,其中严重组和高优先组中的真菌病原体包括烟曲霉、毛霉目、镰刀菌属和组织胞浆菌属。

2、烟曲霉感染引起的侵袭性曲霉病(ia)是最常见的严重临床真菌病之一,烟曲霉也是是引起ifd的主要真菌病原体,其次是镰刀菌属和毛霉目真菌。镰刀菌属感染导致的侵袭性镰刀菌病是一种危及生命的疾病,死亡率从43-67%不等。毛霉目真菌主要感染免疫功能受损的患者,但也可能感染糖尿病控制不佳和经历过创伤的患者,尤其是皮本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.用于真菌四重荧光定量PCR检测的引物组合物,其特征在于,包括扩增烟曲霉anxc4基因区的引物对、扩增毛霉rnl基因区的引物对、扩增荚膜组织胞浆菌Hcp100基因区的引物对、以及扩增镰刀菌Ef1α基因区的引物对;

2.一种真菌四重荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于:包括权利要求1所述的引物组合物,以及用于对烟曲霉、毛霉、镰刀菌和荚膜组织胞浆菌进行实时荧光定量PCR检测的TaqMan探针,其中:

3.如权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,还包括荧光定量PCR反应液、阳性对照、阴性对照;其中:

4.如权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,四种荧光探针的3...

【技术特征摘要】

1.用于真菌四重荧光定量pcr检测的引物组合物,其特征在于,包括扩增烟曲霉anxc4基因区的引物对、扩增毛霉rnl基因区的引物对、扩增荚膜组织胞浆菌hcp100基因区的引物对、以及扩增镰刀菌ef1α基因区的引物对;

2.一种真菌四重荧光定量pcr检测试剂盒,其特征在于:包括权利要求1所述的引物组合物,以及用于对烟曲霉、毛霉、镰刀菌和荚膜组织胞浆菌进行实时荧光定量pcr检测的taqman探针,其中:

3.如权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,还包括荧光定量pcr反应液、阳性对照、阴性对照;其中:

4.如权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,四种荧光探针的3’端均标记有阻抑聚合酶延伸或扩增的基团,四种荧光探针的5’端均标记有荧光报告基团,四种荧光探针的3’端均标记有淬灭基团;其中:

...

【专利技术属性】
技术研发人员:韩黎陈芳艳韦雨桐赵静雅李定辰
申请(专利权)人:中国人民解放军疾病预防控制中心
类型:发明
国别省市:

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