一种提高慢病毒滴度的无血清培养基及其应用制造技术

本申请涉及病毒载体包装技术领域，具体公开了一种提高慢病毒滴度的无血清培养基及其应用。所述无血清培养基包括基础培养基和添加剂；所述添加剂包括重组转铁蛋白、人白蛋白、胎球蛋白A、氢化可的松、黄体酮、重组胰岛素、维生素C磷酸酯钠、血小板衍生生长因子、转化生长因子、油酸、亚油酸、苹果酸、亚硒酸钠和谷氨酰胺。本申请设计的无血清培养基具备良好的细胞培养效果，且有效降低了HEK293T细胞培养的工艺复杂程度，提高了培养上清液中慢病毒滴度，增强了工艺稳定性和产能，符合监管部门鼓励的无血清培养技术路线，具有良好的经济效益。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及病毒载体包装，尤其是涉及一种提高慢病毒滴度的无血清培养基及其应用。

技术介绍

1、hek293t细胞是一种人类细胞系，是贴壁细胞，常被称作“工具细胞”。它是源自hek293原始细胞系的子代细胞系，转染携带sv40复制起点的质粒载体，产生大量重组蛋白。在生物药生产中，hek293t细胞常被用来进行慢病毒包装生产及滴度测定、细胞转染验证等实验，目前培养hek293t细胞多使用基础培养基另外添加胎牛血清的方案。该方案在生产工艺中引入了胎牛血清，胎牛血清属于异种蛋白，批次间质量差异大，对生产工艺稳定性产生很大干扰，最终产生慢病毒包装效果不稳定或不达预期等问题。加入胎牛血清即引入了杂质，需要在最终产品中去除胎牛血清残留并检测残留量，无疑增加了药品生产放行的复杂程度，同时引发监管关注，需要药品生产企业投入很多资源和时间应对监管部门提出的引入工艺杂质产生的药品安全性的关切。

2、hek293t作为贴壁细胞，在培养过程中实现贴壁是其快速增殖的条件，然而目前市场上没有合适的无血清培养基可用于hek293t细胞的贴壁培养。此外，现有的无血清培养基在慢病毒本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种提高慢病毒滴度的无血清培养基，其特征在于，所述无血清培养基包括基础培养基和添加剂；

2.如权利要求1所述的无血清培养基，其特征在于，所述添加剂包括以下浓度的组分：

3.如权利要求2所述的无血清培养基，其特征在于，所述添加剂包括以下浓度的组分：

4.如权利要求1所述的无血清培养基，其特征在于，所述基础培养基包括DMEM培养基。

5.一种如权利要求1～4任一项所述的无血清培养基的制备方法，其特征在于，将基础培养基、重组转铁蛋白、人白蛋白、胎球蛋白A、氢化可的松、黄体酮、维生素C磷酸酯钠、血小板衍生生长因子、转化生长因子、油酸、亚油酸、苹...

【技术特征摘要】

1.一种提高慢病毒滴度的无血清培养基，其特征在于，所述无血清培养基包括基础培养基和添加剂；

2.如权利要求1所述的无血清培养基，其特征在于，所述添加剂包括以下浓度的组分：

3.如权利要求2所述的无血清培养基，其特征在于，所述添加剂包括以下浓度的组分：

4.如权利要求1所述的无血清培养基，其特征在于，所述基础培养基包括dmem培养基。

5.一种如权利要求1～4任一项所述的无血清培养基的制备方法，其特征在于，将基础培养基、重组转铁蛋白、人白蛋白、胎球蛋白a、氢化可的松、黄体酮、维生素c磷酸酯钠、血小板衍生生长因子、转化生长因子、油酸、亚油酸、苹果酸、亚硒酸钠、谷氨酰胺混合搅拌...

【专利技术属性】
技术研发人员：汤培峰，
申请(专利权)人：苏州纽博立科技有限公司，
类型：发明
国别省市：