一种纯化抗体的亲和层析洗脱方法技术

本发明专利技术公开了一种新的纯化抗体的蛋白质亲和层析洗脱方法，更具体地，公开了一种蛋白质亲和层析洗脱方法，其特征在于，在蛋白A亲和层析抗体中，使用乙酸‑乙酸盐缓冲液洗脱抗体主峰并回收。本洗脱方法可以工艺放大，作为生产工艺使用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，特别是涉及亲和层析纯化中的一种洗脱方法。

技术介绍

1、近年来，抗体药物发展迅速，已成为现代生物制品产业的主力军，占全球生物制品市场的50％以上，高特异性、高效价的抗体是进行科研实验研究的基础，抗体纯度的高低将直接影响实验的成败。

2、通过不同方法制备的抗体往往与多种杂蛋白混杂在一起，为了获得成分相对单一的抗体，需要进行抗体纯化。对于igg抗体纯化，主流的纯化方式是protein a，protein a具有和igg的fc片段结合的活性，这种结合是可逆的，protein a在中性ph下与抗体结合，这种特异性的结合不能通过简单的离子强度去洗脱，需要用较低的ph(2.5-3.5)去洗脱，而在较低的ph洗脱条件就会造成抗体的构象发生变化，从而导致抗体发生聚集或降解，降低纯化效率。

3、目前常用低ph洗脱缓冲液如柠檬酸缓冲液、甘氨酸-盐酸缓冲液来解决上述问题，通过低ph缓冲液可以将抗体洗脱下来，此步骤的纯化能够使蛋白纯度达到90％以上。但有些igg抗体由于自身原因如不同亚型、折叠方式和培养过程工艺相关杂质等问题的影响容易导本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种纯化抗体的蛋白质亲和层析洗脱方法，其特征在于，在蛋白A亲和层析抗体中，使用乙酸-乙酸盐缓冲液洗脱抗体主峰并回收。

2.如权利要求1所述的洗脱方法，

3.如权利要求2所述的洗脱方法，所述抗体包含氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的重链内所含的HCDR1功能区、HCDR2功能区与HCDR3功能区；和

4.如权利要求3所述的洗脱方法，所述抗体包含氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示或至少有80％同一性的重链可变区；和/或

5.如权利要去4所述的洗脱方法，所述抗体包含氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的重链；和

6.如...

【技术特征摘要】

1.一种纯化抗体的蛋白质亲和层析洗脱方法，其特征在于，在蛋白a亲和层析抗体中，使用乙酸-乙酸盐缓冲液洗脱抗体主峰并回收。

2.如权利要求1所述的洗脱方法，

3.如权利要求2所述的洗脱方法，所述抗体包含氨基酸序列如seq id no:1所示的重链内所含的hcdr1功能区、hcdr2功能区与hcdr3功能区；和

4.如权利要求3所述的洗脱方法，所述抗体包含氨基酸序列如seq id no:2所示或至少有80％同一性的重链可变区；和/或

5.如权利要去4所述的洗脱方法，所述抗体包含氨基酸序列如seq id no:1所示的重链；和

6.如权利要求1-5任一项所述的洗脱方法，其特征在于，所述乙酸-乙酸盐缓冲液的ph值...

【专利技术属性】
技术研发人员：鲍志浩，黄燕飞，王双越，田姿姿，
申请(专利权)人：甘李药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：