一种核酸免提取试剂及其在核酸检测中的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种核酸免提取试剂，包括如下物质：0.02~6w%裂解液、1~40mM核酸酶抑制剂、20~100mM pH 5~9的缓冲液。本发明专利技术的核酸免提取试剂有以下优势：可作为拭子类样本保存液，常温保存21天核酸不被降解；操作简单、高效，释放速度快且试剂温和，可实现大量样本加样不影响后续检测，灵敏度高，最低检测限为500copies/mL；室温下5min即可完成核酸的释放，避免了加热、洗涤等步骤，所得产物可作为模板直接加入市面通用核酸检测试剂盒用于扩增检测；简化病原体样本处理程序、缩短检测总时长，同时减少暴露风险，显著提高检测效率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子生物学，具体设计一种可以应用于拭子样本的核酸免提取试剂及其在核酸检测中的应用。

技术介绍

1、病原体的核酸提取是分子生物学的基本方法，也是核酸诊断中最关键的方法，它是下游诊断、分析和制备的前提。目前，核酸提取方法迅猛发展，它包括传统的基于溶液的抽提方法、现在常用的柱提取法、正兴起的多效生物分子抽提法和自动化抽提系统，繁琐费时、操作复杂。常规的核酸提取方法均需长时间裂解、多次洗涤、洗脱等过程，虽然有的方法已可实现自动化操作，但所需的样本量大，产品价格也十分昂贵，以上均会影响样本的检测速度以及现场应用。同时样本制备也是最危险的一个环节，一般情况下，工作人员需要在严格进行生物安全三级防护装备后在生物安全柜内完成核酸提取的实验，既要防止被病毒感染又要防止病原体样本被污染。可见，目前所应用的核酸提取方法存在操作繁冗，时间长，需求样本量大的缺点。

2、pcr是聚合酶链式反应的简称，是一种用于放大扩增特定的核酸片段的分子生物学技术。目前市面上已存在多种采用荧光定量pcr技术进行病原体核酸检测的试剂盒，其检测流程一般为：病原体样本核酸提取、r本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种核酸免提取试剂，其特征在于包括如下物质：0.02~6w%裂解液、1~40mM核酸酶抑制剂、20~100mM pH5~9的缓冲液。

2.根据权利要求1所述的核酸免提取试剂，其特征在于，还包括0.01~0.1w‰pH指示剂。

3.根据权利要求1或2所述的核酸免提取试剂，其特征在于，所述裂解剂选自NaOH、NP40、曲拉通、明胶、DMSO、EDTA、Tween20、月桂酰肌氨酸钠、沙凡婷和NAC中的一种或两种以上任意组合。

4.根据权利要求1或2所述的核酸免提取试剂，其特征在于，所述核酸酶抑制剂选自EDTA、异硫氰酸胍和SDS中的一种或两种以上任意组...

【技术特征摘要】

1.一种核酸免提取试剂，其特征在于包括如下物质：0.02~6w%裂解液、1~40mm核酸酶抑制剂、20~100mm ph5~9的缓冲液。

2.根据权利要求1所述的核酸免提取试剂，其特征在于，还包括0.01~0.1w‰ph指示剂。

3.根据权利要求1或2所述的核酸免提取试剂，其特征在于，所述裂解剂选自naoh、np40、曲拉通、明胶、dmso、edta、tween20、月桂酰肌氨酸钠、沙凡婷和nac中的一种或两种以上任意组合。

4.根据权利要求1或2所述的核酸免提取试剂，其特征在于，所述核酸酶抑制剂选自edta、异硫氰酸胍和sds中的一种或两种以上任意组合。

5.根据权利要求1或2所述的核酸免提取试剂，其特征在于，所述缓冲液选自磷酸盐缓冲液、tris-hcl...

【专利技术属性】
技术研发人员：卜蓉蓉，闵超，徐漫，朱威，
申请(专利权)人：基蛋生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：