一种检测穿山甲副流感病毒5型的TaqMan荧光定量PCR引物组和方法技术

本发明专利技术公开了一种检测穿山甲副流感病毒5型的TaqMan荧光定量PCR引物组和方法。本发明专利技术的试剂盒包括针对穿山甲副流感病毒5型的NP蛋白基因的一对特异性引物和TaqMan探针等；该试剂盒扩增曲线良好，特异性强，与除穿山甲副流感病毒5型之外的其他可感染穿山甲的病毒没有交叉反应；检测10倍梯度稀释的阳性标准品，敏感性高最低检出限度为2.35×10<supgt;1</supgt;copies/μL；本发明专利技术采用的TaqMan荧光定量PCR检测方法，具有灵敏度高、特异性强、耗时短等优势。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，具体涉及一种检测穿山甲副流感病毒5型的taqman荧光定量pcr引物组和方法。

技术介绍

1、副流感病毒5型(parainfluenza virus 5，piv5)为单股负链不分节段的rna病毒，属于副黏病毒科(paramyxoviridae)副黏病毒亚科(paramyxovirinae)腮腺炎病毒属(rubula-virus)，可引起穿山甲、犬、猫、猪、牛、仓鼠、豚鼠等多种动物及人呼吸道感染。piv5病毒粒子直径为150～200nm，通常呈圆形。piv5可感染包括人类细胞在内的多种细胞，且在大多数细胞中均可获得高滴度的病毒，其中以非洲绿猴肾细胞(vero细胞)更敏感。piv5对热不稳定，且在酸碱溶液中容易被破坏。病毒有血凝性，能在4℃或25℃的条件下凝集包括豚鼠、犬、家兔、鸡、猪及人o型血红细胞。

2、piv5是引起动物脑脊髓炎和犬窝咳的主要病因之一，且piv5呈世界性的分布。piv5的传染迅速且单一感染情况并不多见，常与细菌(支气管博代氏菌)、支原体和病毒(腺病毒-2型)等病原混合感染。尤其在动物受到应激作用或免疫抑制时本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种检测穿山甲副流感病毒5型(Parainfluenza virus 5)的TaqMan荧光定量PCR引物探针组，其特征在于，包括一对特异性引物和TaqMan探针，所述的特异性引物为PIV5-F和PIV5-R，所述的PIV5-F的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述的PIV5-R的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述的TaqMan探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，TaqMan探针的5’端标记有荧光报告基团，3’端标记有荧光淬灭基团。

2.根据权利要求1所述的引物探针组，其特征在于，所述的荧光报告基团为HEX，所述的荧光淬灭基团为BHQ1。...

【技术特征摘要】

1.一种检测穿山甲副流感病毒5型(parainfluenza virus 5)的taqman荧光定量pcr引物探针组，其特征在于，包括一对特异性引物和taqman探针，所述的特异性引物为piv5-f和piv5-r，所述的piv5-f的核苷酸序列如seq id no.1所示，所述的piv5-r的核苷酸序列如seq id no.2所示，所述的taqman探针的核苷酸序列如seq id no.3所示，taqman探针的5’端标记有荧光报告基团，3’端标记有荧光淬灭基团。

2.根据权利要求1所述的引物探针组，其特征在于，所述的荧光报告基团为hex，所述的荧光淬灭基团为bhq1。

3.一种含有权利要求1所述的特异性引物和taqman探针的试剂盒。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒还包括2×universal...

【专利技术属性】
技术研发人员：张立娜，侯方晖，朱玲君，王鹤，王凯，李珺，黄万和，
申请(专利权)人：广东生态工程职业学院，
类型：发明
国别省市：