具有促增殖和血管生成功能的间充质干细胞来源外泌体细分亚群及其制备方法和应用技术

具有促增殖和血管生成功能的间充质干细胞来源外泌体细分亚群及其制备方法和应用，分离培养人脐带间充质干细胞，收集P5‑P7代间充质干细胞的条件培养基上清，通过切向流系统+尺寸排阻色谱柱+亲和层析分离外泌体亚群，根据粒子径将外泌体亚群命名为S2‑Exo，粒子径范围峰值在90nm

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及生物医药，尤其是涉及一种具有促增殖和血管生成功能的间充质干细胞来源外泌体细分亚群及其制备方法和应用。

技术介绍

1、间充质干细胞(mesenchymal stem cells,mscs)是一种具有分化、增殖及自我更新能力的成体多能干细胞。机体大多数组织，如骨髓、脂肪、皮肤、肌腱、肌肉、牙髓、胎盘、脐带中都存在mscs。mscs在早期研究中发现能够分化为中胚层来源的细胞，具备分化为成脂、成骨、成软骨细胞和骨骼肌肌细胞的能力。此外mscs也能转分化为外胚层或内胚层来源的细胞如肝细胞、神经细胞或上皮细胞。关于mscs调节组织细胞损伤修复和再生的机制，研究人员发现mscs到达损伤部位后主要通过旁分泌调控发挥作用，具体包括：(1)分泌蛋白、多肽和激素；(2)转移线粒体；(3)分泌外泌体(exosomes)或微囊泡(microvesicles)，通过囊泡内含有的rna、蛋白质或其它分子发挥调控作用。mscs产生的细胞外囊泡(extracellularvesibles，evs)与mscs发挥相似的作用，能够影响组织对于损伤、感染和疾病的反应，调节细胞和细胞之间本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种间充质干细胞外泌体亚群的制备方法，其特征在于：分离培养人脐带间充质干细胞，收集P5-P7代间充质干细胞的条件培养基上清，通过切向流系统+尺寸排阻色谱柱+亲和层析分离外泌体亚群，根据粒子径将外泌体亚群命名为S2-Exo，粒子径范围峰值在90nm+15nm，平均粒径为100+15nm，表面标志物为B2M，PRDX2，FLOT1，FLOT2，MSN，CD63，GSN。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤为：S1、细胞选择：选取在对数生长期的7代以内，健康产妇分娩所得脐带来源的间充质干细胞；S2、细胞培养：选择DMEM/F12培养基，含胎牛血清，血清浓度为10...

【技术特征摘要】

1.一种间充质干细胞外泌体亚群的制备方法，其特征在于：分离培养人脐带间充质干细胞，收集p5-p7代间充质干细胞的条件培养基上清，通过切向流系统+尺寸排阻色谱柱+亲和层析分离外泌体亚群，根据粒子径将外泌体亚群命名为s2-exo，粒子径范围峰值在90nm+15nm，平均粒径为100+15nm，表面标志物为b2m，prdx2，flot1，flot2，msn，cd63，gsn。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤为：s1、细胞选择：选取在对数生长期的7代以内，健康产妇分娩所得脐带来源的间充质干细胞；s2、细胞培养：选择dmem/f12培养基，含胎牛血清，血清浓度为10%，将步骤s1选取的间充质干细胞置于细胞培养基中培养，直至细胞融合度达到70％；s3、含外泌体的培养上清收集：去除步骤s2所用的培养基，并用pbs清洗3遍，而后补充加入无血清条件培养基，收集细胞培养上清液；s4、外泌体分离：将步骤s3得到的培养上清液，通过深层过滤去除大囊...

【专利技术属性】
技术研发人员：李晶，吴庭鹤，刘伟，王新雨，陈雅婷，
申请(专利权)人：南京医科大学，
类型：发明
国别省市：