具有免疫调节、抗炎和抗纤维化功能的间充质干细胞来源外泌体细分亚群及其制备方法和应用技术

技术编号:41805902 阅读:25 留言:0更新日期:2024-06-24 20:26
具有免疫调节、抗炎和抗纤维化功能的间充质干细胞来源外泌体细分亚群及其制备方法和应用。分离培养人脐带间充质干细胞,收集P5‑P7代间充质干细胞的条件培养基上清,通过切向流系统+尺寸排阻色谱柱方法分离外泌体亚群,根据粒子径及其他外泌体特异表征将外泌体细分亚群命名为S1‑Exo。粒子径范围峰值在120nm

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及生物医药,尤其是涉及一种具有免疫调节、抗炎和抗纤维化功能的间充质干细胞来源外泌体细分亚群及其制备方法和在一些炎症相关疾病更有效创新药商业开发上的应用。


技术介绍

1、间充质干细胞(mesenchymal stem cells,mscs),也可以定义为多能间充质基质细胞,具有多种独特特征,包括分化潜力、集落形成和自我更新能力。它们可以分化为间充质谱系细胞,如成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、内皮细胞和心肌细胞,以及非间充质谱系细胞,如肝细胞和神经元细胞类型。mscs几乎存在于所有组织中,并参与组织再生和稳态维持。mscs的免疫抑制特性已在炎症和自身免疫性疾病的临床前研究和试验中得到证实。研究人员发现mscs到达损伤部位后并不增殖而是主要通过旁分泌调控发挥作用,而分泌细胞外囊泡(extracellular vesicles,evs)-外泌体(exosomes)或微囊泡(microvesicles),是其发挥作用的主要机制。通过囊泡内含有的rna、蛋白质或其它分子,mscs来源的evs已被证明具有与亲本细胞相似的治疗特性,能够影响组织对于损伤、感染和疾病的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种间充质干细胞来源外泌体细分亚群的制备方法,其特征在于:分离培养人脐带间充质干细胞,收集P5-P7代间充质干细胞的条件培养基上清,通过切向流系统+尺寸排阻色谱柱方法分离外泌体亚群,根据粒子径将外泌体亚群命名为S1-Exo,粒子径范围峰值在120nm+15nm,平均粒径为130+15nm,表面标志物为HRS,HSPA4,RAS1B,A2M,Syntenin-1,CD9,GPC1,DPP4,HSP90AA1,HSP90AB1,ALIX,CD81,TSG101,Filamin-A。

2.根据权利要求1所述的制备方法。其特征在于,步骤为:S1、细胞选择:选取在对数生长期的7代以...

【技术特征摘要】

1.一种间充质干细胞来源外泌体细分亚群的制备方法,其特征在于:分离培养人脐带间充质干细胞,收集p5-p7代间充质干细胞的条件培养基上清,通过切向流系统+尺寸排阻色谱柱方法分离外泌体亚群,根据粒子径将外泌体亚群命名为s1-exo,粒子径范围峰值在120nm+15nm,平均粒径为130+15nm,表面标志物为hrs,hspa4,ras1b,a2m,syntenin-1,cd9,gpc1,dpp4,hsp90aa1,hsp90ab1,alix,cd81,tsg101,filamin-a。

2.根据权利要求1所述的制备方法。其特征在于,步骤为:s1、细胞选择:选取在对数生长期的7代以内,健康产妇分娩所得脐带来源的间充质干细胞;s2、细胞培养:选择dmem/f12培养基,含胎牛血清,血清浓度为10%,将步骤s1选取的间充质干细胞置于细胞培养基中培养,直至细胞融合度达到70%;s3、含外泌体的培养上清收集:去除步骤s2所用的培养基,并用pbs清洗3遍,而后补充加入无血清条件培养基,收集细胞培养上清液;s4、外泌体分离:将步骤s3得到的培养上清液,分别经过深层过滤去除大囊泡及凋亡...

【专利技术属性】
技术研发人员:吴庭鹤李晶刘伟王新雨
申请(专利权)人:南京科恩里斯生物医药有限公司
类型:发明
国别省市:

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