一种基于特异性转录调控因子的D-2-羟基戊二酸生物传感器及其应用制造技术

本发明专利技术属于生物检测技术领域，具体涉及一种基于特异性转录调控因子的D‑2‑羟基戊二酸生物传感器及其应用。本发明专利技术首次发现一种特异性响应于D‑2‑羟基戊二酸的转录调控因子DhcR，将其与环状重排荧光蛋白组合获得的融合蛋白可作为检测D‑2‑羟基戊二酸的生物传感器使用，经试验证明，本发明专利技术所开发的生物传感器具备响应幅度高、荧光亮度强、亲和力适中等优点，可以高效、高时空分辨、低成本的方式实现不同生物学样品中以及微生物、哺乳动物细胞内D‑2‑羟基戊二酸的定量检测，因此具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物检测，具体涉及一种基于特异性转录调控因子的d-2-羟基戊二酸生物传感器及其应用。

技术介绍

1、公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

2、d-2-羟基戊二酸(d-2-hg)是微生物、植物、动物中普遍存在的内源性代谢物，在l-丝氨酸、脂多糖、磷酸吡哆醛的合成和4-羟基丁酸、谷氨酸、d-赖氨酸的分解等生理过程中发挥关键作用。此外，在神经代谢疾病d-2-羟基戊二酸尿症和异柠檬酸脱氢酶(idh1/2)突变的胶质瘤、急性髓性白血病、软骨肉瘤等病人的体液样本或肿瘤组织中可检测到高达毫摩尔级别的d-2-hg积累。因而，d-2-hg浓度被视为d-2-羟基戊二酸尿症的临床诊断、部分肿瘤的发生与治疗过程监测的关键指标。实现胞内外d-2-hg高效、灵敏、低成本的检测对d-2-hg相关疾病的诊疗、代谢机制与功能多样性研究与具有重要意义。

3、传统的d-2-hg检测主要依赖于液相色谱-串联质谱(lc-ms/ms)、气相色谱-本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种转录调控因子，其特征在于，所述转录调控因子的氨基酸序列和核苷酸序列如SEQ ID NO.1-2所示。

2.一种融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白至少包括权利要求1所述转录调控因子，以及，与所述转录调控因子连接的环状重排荧光蛋白；

3.一种编码权利要求2所述融合蛋白的核酸分子；

4.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体含有权利要求3所述核酸分子。

5.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞含有权利要求3所述核酸分子、权利要求4所述重组表达载体或能够表达权利要求2所述融合蛋白。

6.权利要求2所述融合蛋白、权利要求...

【技术特征摘要】

1.一种转录调控因子，其特征在于，所述转录调控因子的氨基酸序列和核苷酸序列如seq id no.1-2所示。

2.一种融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白至少包括权利要求1所述转录调控因子，以及，与所述转录调控因子连接的环状重排荧光蛋白；

3.一种编码权利要求2所述融合蛋白的核酸分子；

4.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体含有权利要求3所述核酸分子。

5.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞含有权利要求3所述核酸分子、权利要求4所述重组表达载体或能够表达权利要求2所述融合蛋白。

6.权利要求2所述融合蛋白、权利要求3所述核酸分子、权利要求4所述重组表达载体和/或权利要求5所述宿主细胞在制备d-2-hg生物传感器中的应用。

【专利技术属性】
技术研发人员：高超，刘一东，康照琪，徐蓉，吕传娟，马翠卿，许平，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：

全部详细技术资料下载 我是这个专利的主人