一种抗柑橘黄龙病的非典型MEKK蛋白CsMEKK1-1及抗病柑橘制备方法技术

本发明专利技术公开了一种抗柑橘黄龙病的非典型MEKK蛋白CsMEKK1‑1及抗病柑橘制备方法，通过调节柑橘属植物中CsMEKK1‑1蛋白的表达水平，提高柑橘属植物对柑橘黄龙病的抗性；具体包括以下步骤：(1)克隆柑橘CsMEKK1‑1基因序列；(2)构建过表达载体；(3)过表达载体转化柑橘，得到CsMEKK1‑1基因表达水平上调的转基因植株。本发明专利技术通过克隆柑橘CsMEKK1‑1基因编码序列，构建过表达载体，然后转化柑橘，得到的CsMEKK1‑1过表达转基因植株CaLas含量明显低于野生型，能够有效显著的减轻黄龙病的发病程度，从而显著提高柑橘对黄龙病的抗性，并且不影响转基因植株的表型，对于柑橘的抗黄龙病育种具有重大的应用价值，可以作为候选基因同多个黄龙病抗、感病基因进行黄龙病抗性育种。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子生物学，具体而言，涉及一种抗柑橘黄龙病的非典型mekk蛋白csmekk1-1及抗病柑橘制备方法。

技术介绍

1、柑橘是我国最重要的果树树种之一。然而，随着柑橘产业的发展，柑橘黄龙病(citrus huanglongbing,hlb)已成为危害柑橘产业发展最严重的病害，黄龙病病原菌为韧皮部杆菌属(candidatus liberibacter)细菌，包括亚洲种(candidatus liberibacterasiatium，calas)、非洲种(candidatus liberibacter africanum，calaf)和美洲种(candidatus liberibacter americanus，calam)，其中calas是世界范围柑橘产区的主要致病种，几乎危害所有柑橘品种。

2、因此开展黄龙病防控技术和抗病育种的研究时非常必要的。然而，由于柑橘遗传背景高度杂合，再加上(1)calas为难培养细菌，迄今无法人工分离培养；(2)木虱或接穗嫁接传毒方法无法控制病原菌的含量和纯度，且潜育期和发病周期长，接种成功率低；(3)病原本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种抗柑橘黄龙病的非典型MEKK蛋白CsMEKK1-1，其特征在于，所述CsMEKK1-1蛋白为MAPK级联反应中第一级联的蛋白磷酸激酶，不含有MEKK蛋白的特征型G(T/S)Px(W/Y/F)MAPEV结构域，只含MAPKKK家族蛋白激酶功能结构域PKc和保守的GxGxxGxV模块，所述CsMEKK1-1蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，通过调节柑橘属植物中CsMEKK1-1蛋白的表达水平，提高柑橘属植物对柑橘黄龙病的抗性。

2.根据权利要求1所述的抗柑橘黄龙病的非典型MEKK蛋白CsMEKK1-1，其特征在于，编码CsMEKK1-1蛋白的核苷酸序列如SEQ...

【技术特征摘要】

1.一种抗柑橘黄龙病的非典型mekk蛋白csmekk1-1，其特征在于，所述csmekk1-1蛋白为mapk级联反应中第一级联的蛋白磷酸激酶，不含有mekk蛋白的特征型g(t/s)px(w/y/f)mapev结构域，只含mapkkk家族蛋白激酶功能结构域pkc和保守的gxgxxgxv模块，所述csmekk1-1蛋白的氨基酸序列如seq id no：1所示，通过调节柑橘属植物中csmekk1-1蛋白的表达水平，提高柑橘属植物对柑橘黄龙病的抗性。

2.根据权利要求1所述的抗柑橘黄龙病的非典型mekk蛋白csmekk1-1，其特征在于，编码csmekk1-1蛋白的核苷酸序列如seq id no：2所示。

3.根据权利要求1所述的抗柑橘黄龙病的非典型mekk蛋白csmekk1-1，其特征在于，调节csmekk1-1蛋白表达水平的具体方法为：上调柑橘属植物中csmekk1-1蛋白的表达水平，激活mapk信号通路。

4.根据权利要求3所述的抗柑橘黄龙病的非典型mekk蛋白csmekk1-1及抗病柑橘制备方法，其特征在于，上调柑橘属植物中csmekk1-1蛋白表达水平的方式采用过表达载体控制csmekk1-1基因在柑橘细胞中的表达，上调柑橘csmekk1-1蛋白的积累。

5.一种具有抗柑橘黄龙病的非典型mekk蛋白csmekk1-1的抗病柑橘制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

6.根据权利要求5所述的具有抗柑橘黄龙病的非典型mekk蛋白csmekk1-1的抗病柑橘制备方法，其特征在于，步骤(1)中，柑橘csmekk1-1基因编码序列的克隆方法为：提取柑橘总rna，然后反转录为cdna，最后采用高保真酶p...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹修平，董丽婷，商兰月，杜美霞，莫凯琴，许兰珍，龙琴，李强，何永睿，
申请(专利权)人：西部重庆科学城种质创制大科学中心，
类型：发明
国别省市：