一种高通量筛选SARM1抑制剂的方法及其应用技术

本发明专利技术涉及生物医药技术领域，尤其涉及一种高通量筛选SARM1抑制剂的方法及其应用，包括以下步骤：S1、向孔板中加入不同浓度的SARM1抑制剂；S2、向孔板中加入SARM1；S3、向孔板中加入β‑NAD+和NUDT5；S4、向孔板中加入AMP检测试剂；S5、通过酶标仪读取化学发光信号值，并通过化学发光信号值拟合，得到SARM1抑制剂的IC<subgt;50</subgt;值。本发明专利技术的方法可实现SARM1抑制剂的高通量筛选，反应灵敏度高，使用蛋白浓度低且信噪比高，大大降低化合物的检测限，能够检测到更加有潜力的SARM1抑制剂，而且数据质量好，可以真实有效的反馈抑制剂对SARM1酶活性的抑制情况。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医药，尤其是涉及一种高通量筛选sarm1抑制剂的方法及其应用。

技术介绍

1、toll样受体（toll-like receptors，tlr）是参与非特异性免疫（天然免疫）的一类重要蛋白质分子， 也是连接非特异性免疫和特异性免疫的桥梁。tlr是单个的跨膜非催化性蛋白质，可以识别来源于微生物的具有保守结构的分子。当微生物突破机体的物理屏障，如皮肤、黏膜等时，tlr可以识别它们并激活机体产生免疫细胞应答。

2、sarm1（toll样受体家族的接头蛋白）是tlrs通路最后一个被发现的接头分子，与tlrs通路中其他四个接头分子的激活作用不同，sarm1专门负调控诱导ifn-β的包含tir结构域的接头分子依赖的tlr3和tlr4通路。sarm1蛋白在周围神经病变、创伤性脑损伤以及神经退行性疾病等多种神经系统疾病中发挥关键作用。研究表明，损伤可以激活sarm1并引发轴突变性。因此，sarm1是一个有吸引力的可成药靶点，针对该靶点的抑制剂开发正进行得如火如荼。

3、sarm1蛋白自身以环状的八聚体形式存在，arm结构域（sarm本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种高通量筛选SARM1抑制剂的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的高通量筛选SARM1抑制剂的方法，其特征在于，步骤S1包括：

3.根据权利要求2所述的高通量筛选SARM1抑制剂的方法，其特征在于，步骤S1中，所述SARM1抑制剂的浓度为：100μM、33.3μM、11.1μM、3.7μM、1.23μM、0.41μM、0.137μM、0.045μM、0.015μM、0.005μM、0.002μM、0μM。

4.根据权利要求1所述的高通量筛选SARM1抑制剂的方法，其特征在于，步骤S1中，所述SARM1抑制剂为5-碘异喹啉。<...

【技术特征摘要】

1.一种高通量筛选sarm1抑制剂的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的高通量筛选sarm1抑制剂的方法，其特征在于，步骤s1包括：

3.根据权利要求2所述的高通量筛选sarm1抑制剂的方法，其特征在于，步骤s1中，所述sarm1抑制剂的浓度为：100μm、33.3μm、11.1μm、3.7μm、1.23μm、0.41μm、0.137μm、0.045μm、0.015μm、0.005μm、0.002μm、0μm。

4.根据权利要求1所述的高通量筛选sarm1抑制剂的方法，其特征在于，步骤s1中，所述sarm1抑制剂为5-碘异喹啉。

5.根据权利要求1所述的高通量筛选sarm1抑制剂的方法，其特征在于，步骤s2包括：向孔板中加入浓度为50~200 nm的sarm1，离心后孵育。

6.根据权利要求1所述的高通量筛选s...

【专利技术属性】
技术研发人员：夏强，王乾，张晓春，邴铁军，李英骥，闫励，
申请(专利权)人：北京爱思益普生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：