一种甲苯磺酸艾多沙班手性中间体的生物合成方法及生物酶技术

本发明专利技术涉及酶工程技术领域，尤其是一种甲苯磺酸艾多沙班手性中间体的生物合成方法及生物酶，该方法由化合物II作为起始原料，在缓冲液、助溶剂、辅酶PLP、氨基供体的存在下，经生物酶催化转化为化合物I，其反应路线为，其中，生物酶的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明专利技术方法减少了甲苯磺酸艾多沙班中间体生产过程中化学催化剂的使用，方法简单，反应条件温和，对环境优化，具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及酶工程，具体领域为一种生物酶以及甲苯磺酸艾多沙班手性中间体的生物合成方法。

技术介绍

1、2015年，由日本第一三共公司开发的艾多沙班对甲苯磺酸盐一水合物(商品名：savaysa)获fda批准上市。甲苯磺酸艾多沙班(edxb)是日本上市的首个口服给药的抗凝药物，在全球也是首次问世。edxb为直接fxa抑制剂，而fxa正是当今开发新一代抗凝药物的主要靶点。口服给药为临床用药提供方便，临床试验验证了本品安全有效。edxb将在抗凝药物领域占据更多的优势。

2、甲苯磺酸艾多沙班，化学名为n1-(5-氯吡啶-2-基)-n2-((1s,2r,4s)-4-((二甲氨基)羰基)-2-(((5-甲基-4,5,6,7-四氢噻唑并[5,4-c]吡啶-2-基)甲酰基)氨基)环己基)乙二酰胺对甲苯磺酸一水合物，edxb(1s，2r，4s)的结构式详见下式。

3、

4、甲苯磺酸艾多沙班(edxb)作为小分子化药，目前虽然现有技术中主要合成方法是通过化学合成(如cn114736218a)，其中有一个关键的手性氨(结构如上式所示)，通过化本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种生物酶，其特征在于：其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

2.根据权利要求1所述的生物酶，其特征在于：其氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。

3.权利要求1或2所述的生物酶的制备方法，其特征在于：将过表达转氨酶的重组工程菌Escherichia coli，工程菌编号T-001接种至LB液体培养基中，接种量为培养基体积的1～5％，37℃的条件下，220rpm摇床中过夜培养后，作为种子液；将新鲜的种子液接入TB培养基中发酵培养，37℃的条件下，220rpm摇床中培养至OD600在0.6～0.8时向培养基中加入IPTG，IPTG的浓度为0.5mM，再于...

【技术特征摘要】

1.一种生物酶，其特征在于：其核苷酸序列如seq id no.3所示。

2.根据权利要求1所述的生物酶，其特征在于：其氨基酸序列如seq id no.4所示。

3.权利要求1或2所述的生物酶的制备方法，其特征在于：将过表达转氨酶的重组工程菌escherichia coli，工程菌编号t-001接种至lb液体培养基中，接种量为培养基体积的1～5％，37℃的条件下，220rpm摇床中过夜培养后，作为种子液；将新鲜的种子液接入tb培养基中发酵培养，37℃的条件下，220rpm摇床中培养至od600在0.6～0.8时向培养基中加入iptg，iptg的浓度为0.5mm，再于18℃诱导16h；发酵液诱导结束后，于4℃，12000rpm离心5min，收集菌体；用ph7.0，0.2m的pb缓冲液重洗后重悬，超声破碎后冻干，获得冻干酶粉。

4.采用权利要求1或2所述的生物酶进行甲苯磺酸艾多沙班中间体生物合成的方法，其特征在于：由化合物ii作为起始原料，在缓冲液、助溶剂、辅酶plp、氨基供体的存...

【专利技术属性】
技术研发人员：江涛，魏海玉，邓波，杨勤，
申请(专利权)人：重庆普佑生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：