一种光驱合成蔗糖和肉桂酸的聚球藻7942工程菌的构建方法技术

本发明专利技术公开了一种光驱合成蔗糖和肉桂酸的聚球藻7942工程菌的构建方法，包括：步骤S1，以质粒pUC‑tho为模板扩增得到Ptho；步骤S2，以集胞藻6803基因组为模板扩增得到Pcpc560；步骤S3，以质粒pUC‑PAL为模板扩增得到pal；步骤S4，以质粒pUC‑cscB为模板扩增得到cscB；步骤S5，以整合型质粒Pcp3031为模板扩增得到Trbcl；步骤S6，将Pcpc560、pal、Trbcl进行融合，并与表达载体pSI‑SPE进行连接，将形成的重组表达载体转入聚球藻7942中，得到可生产反式肉桂酸的菌株7942‑PAL；步骤S7，将Ptho、cscB、Trbcl进行融合，并与表达载体pSⅡ‑CM进行连接，形成的重组表达载体转入可生产反式肉桂酸的菌株7942‑PAL中，得到光驱合成蔗糖和反式肉桂酸的菌株7942‑CP。能够仅依靠光照和CO<subgt;2</subgt;，就能实现蔗糖和反式肉桂酸的同时生物合成。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及工业微生物，具体为一种光驱合成蔗糖和肉桂酸的聚球藻7942工程菌的构建方法。

技术介绍

1、反式肉桂酸（trans-cinnamic acid, tca）是植物中的一种主要酚类化合物，是多种多酚（例如二苯乙烯和类黄酮）的前体，分子式为c9h8o2。许多研究报道反式肉桂酸具有广泛的生物活性，包括抗氧化和抗菌活性，并且在食品和化妆品应用中也具有很高的潜力。反式肉桂酸可以从植物中分离，然而由于环境和地理条件难以优化，该方法尚未克服产量低的问题。反式肉桂酸还可以通过有机化学合成方法合成：乙酸酐和苯甲醛在乙酸钠存在下进行缩合反应。尽管迄今为止化学合成法占反式肉桂酸生产的最大部分，但它是一个能源密集型且非绿色的过程，因为它需要高温条件和化石资源。生物合成是一种非常有前途的替代传统从天然来源提取或化学合成的方法，其中蓝细菌作为一个绿色生产平台，已经被使用从co2生产反式肉桂酸。

2、蔗糖是一种二糖，是由葡萄糖和果糖亚基组成。它是在植物中天然产生的，分子式为c12h22o11，蔗糖通常是从甘蔗或甜菜中提取和精制，是食品工业和生物乙醇生产的重要原料本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种光驱合成蔗糖和肉桂酸的聚球藻7942工程菌的构建方法，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的一种光驱合成蔗糖和肉桂酸的聚球藻7942工程菌的构建方法，其特征在于，所述步骤S1中，质粒pUC-tho是由茶碱诱导型启动子Ptho核苷酸序列进行合成的；

3.根据权利要求1所述的一种光驱合成蔗糖和肉桂酸的聚球藻7942工程菌的构建方法，其特征在于，所述步骤S6包括：

4.根据权利要求3所述的一种光驱合成蔗糖和肉桂酸的聚球藻7942工程菌的构建方法，其特征在于，所述步骤S64包括：

5.根据权利要求4所述的一种光驱合成蔗糖和肉桂酸的聚球...

【技术特征摘要】

1.一种光驱合成蔗糖和肉桂酸的聚球藻7942工程菌的构建方法，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的一种光驱合成蔗糖和肉桂酸的聚球藻7942工程菌的构建方法，其特征在于，所述步骤s1中，质粒puc-tho是由茶碱诱导型启动子ptho核苷酸序列进行合成的；

3.根据权利要求1所述的一种光驱合成蔗糖和肉桂酸的聚球藻7942工程菌的构建方法，其特征在于，所述步骤s6包括：

4.根据权利要求3所述的一种光驱合成蔗糖和肉桂酸的聚球藻7942工程菌的构建方法，其特征在于，所述步骤s64包括：

5.根据权利要求4所述的一种光驱合成蔗糖和肉桂酸的聚球藻7942工程菌的构建方法，其特征在于，所述步骤s645中，bg-11液体培养基是由1.5g的nano3，0.04g的k2hpo4·3h2o，0.075g的mgso4·7h2o，0.001g的edta，0.02g的na2co3，2.86g的h3bo3，1.81g的mncl2·4h2o，0.222g的znso4·7h2o，0.390g的namoo...

【专利技术属性】
技术研发人员：张卫文，鞠悦，宋馨宇，陈磊，
申请(专利权)人：天津大学，
类型：发明
国别省市：