一种生产蛋白颗粒纳米疫苗的工程菌及其构建方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种生产蛋白颗粒纳米疫苗的工程菌及其构建方法和应用，属于纳米颗粒疫苗制备技术领域。本发明专利技术首次公开一种群感调控同步裂解释放蛋白颗粒纳米疫苗的工程菌，使抗原规律地分布在蛋白纳米颗粒表面，显著提高局部抗原的有效密度，进而有效改善抗原的免疫效应；以具有二十面体对称结构的细菌微组分BMCH为骨架，制备的群感调控同步裂解释放蛋白颗粒纳米疫苗的工程菌，可以合成具有二十面体对称结构的纳米疫苗，在群感信号的调控下，有望实现纳米疫苗—(BMCH‑AH1‑A5)的周期性释放；工程菌构建方法，过程简单、易操作、制备成功率高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及纳米颗粒疫苗制备，尤其是涉及一种生产蛋白颗粒纳米疫苗的工程菌及其构建方法和应用。

技术介绍

1、口服蛋白质疫苗是一种安全性高、依从性强的免疫手段，fda批准的口服蛋白质疫苗主要用于肠道病原菌(如霍乱弧菌)感染的治疗。口服蛋白质疫苗是生物药与新型疫苗领域的前沿热点。口服蛋白质疫苗允许蛋白质抗原在通过胃肠运输时直接暴露于肠道相关淋巴组织，从而激活黏膜免疫应答。甚至更有效地激活机体的系统免疫，以建立更广泛和持久的免疫保护。蛋白质疫苗的口服递送需要克服恶劣的胃肠道环境，避免诱导免疫耐受以实现有效保护。

2、随着纳米技术的发展，科学家们开发出了纳米颗粒疫苗，助力口服蛋白质疫苗递送，不仅可以保护蛋白质抗原过早降解，而且将抗原靶向递送到抗原提呈细胞。纳米颗粒作为免疫佐剂、递送载体和抗原展示平台，在提高免疫原性、增强疫苗免疫效应中扮演着重要角色。目前，纳米颗粒疫苗的研究大都处于临床试验阶段或临床前研究，如呼吸道合胞病毒疫苗、流感疫苗和covid-19疫苗等。

3、随着合成生物学技术的发展，人们通过dna操作技术来改造细菌用于构建生产激本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种生产蛋白颗粒纳米疫苗的工程菌的构建方法，其特征在于：步骤如下：

2.根据权利要求1所述的一种生产蛋白颗粒纳米疫苗的工程菌的构建方法，其特征在于，所述步骤S1构建稳定表达细菌微组分蛋白颗粒工程菌的具体步骤如下：

3.根据权利要求2所述的一种生产蛋白颗粒纳米疫苗的工程菌的构建方法，其特征在于：所述步骤S1.1中扩增载体的上游引物序列如SEQ ID NO.1所示，下游引物如SEQ IDNO.2所示，扩增目的基因的上游引物序列如SEQ ID NO.3所示，下游引物如SEQ ID NO.4所示。

4.根据权利要求2所述的一种生产蛋白颗粒纳米疫苗的工程菌的...

【技术特征摘要】

1.一种生产蛋白颗粒纳米疫苗的工程菌的构建方法，其特征在于：步骤如下：

2.根据权利要求1所述的一种生产蛋白颗粒纳米疫苗的工程菌的构建方法，其特征在于，所述步骤s1构建稳定表达细菌微组分蛋白颗粒工程菌的具体步骤如下：

3.根据权利要求2所述的一种生产蛋白颗粒纳米疫苗的工程菌的构建方法，其特征在于：所述步骤s1.1中扩增载体的上游引物序列如seq id no.1所示，下游引物如seq idno.2所示，扩增目的基因的上游引物序列如seq id no.3所示，下游引物如seq id no.4所示。

4.根据权利要求2所述的一种生产蛋白颗粒纳米疫苗的工程菌的构建方法，其特征在于：所述步骤s1.1中prsfduettm-1的pcr扩增体系为：prime star max premix(2×)10μl；ddh2o 5μl；上游引物2μl；下游引物2μl；以目的基因bmc-h和prsfduettm-1载体为模板，分别添加1μl；扩增程序为98℃10s；98℃10s，55℃5s，72℃15s，共30个循环；72℃5min；12℃10min。

5.根据权利要求1所述的一种生产蛋白颗粒纳米疫苗的工程菌的构建方法，其特征在于，所述步骤s2构建稳定表达细菌微...

【专利技术属性】
技术研发人员：叶硕，张英英，徐凌云，倪可欣，尹杭，陆昱利，陈诗情，汤敏煊，李亦泽，
申请(专利权)人：徐州医科大学，
类型：发明
国别省市：