一种引物探针组合物、试剂盒和检测方法技术

本发明专利技术提供一种引物探针组合物、试剂盒和检测方法，属于突变位点检测技术领域。其中，包括：错配引物和反向探针；错配引物的核酸序列如SEQ ID NO.1所示；错配引物的核酸序列中5’端的第16‑17号位置以及第26‑27号位置设有通配符NN；通配符NN选自AG、CG、AT、TT、GT、AC、TC、GC和TG中的任意一种；反向探针的核酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明专利技术提供的引物探针组合物，以及基于引物探针组合物的试剂盒，具有灵敏度高、特异性强、操作程序简单、检测时间短等优点，适用于非实验室环境下临床现场快速检测，具有广泛的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于突变位点检，尤其涉及一种引物探针组合物、试剂盒和检测方法。

技术介绍

1、表皮生长因子受体(egfr)基因突变是东亚人群中非小细胞肺癌(nsclc)最常见的驱动基因突变，突变率为30％-40％。以往多项研究支持egfr-酪氨酸激酶抑制剂(tki)治疗是egfr基因突变局部晚期或转移nsclc患者的标准治疗方案，但几乎所有服用egfr-tki的患者最终都会出现耐药，其中egfr基因第20号外显子发生错义突变(t790m突变)是耐药突变中最主要的类型。

2、目前已报道的egfr-tki耐药后组织样本的t790m突变阳性率基本在60％左右，血浆样本t790m突变阳性率基于不同方法差别较大，在23％-63％。目前，美国国立综合癌症网络(nccn)、欧洲临床肿瘤协会(esmo)指南、中国临床肿瘤学会(csco)原发性肺癌诊疗指南均推荐奥希替尼为局部晚期或转移nsclc egfr-tki耐药后t790m突变阳性患者的标准治疗。因此，egfr基因t790m突变检测对egfr-tki耐药的晚期nsclc患者后续治疗具有重要的临床指导意义。

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【技术保护点】

1.一种引物探针组合物，其特征在于，应用于检测肿瘤耐药基因SNP突变位点，包括：错配引物和反向探针；

2.如权利要求1所述引物探针组合物，其特征在于，所述错配引物的5’端标记有荧光素；

3.如权利要求1所述引物探针组合物，其特征在于，所述反向探针中标记有四氢呋喃，并且5’端标记有生物素，3’端标记有间臂基团；

4.一种试剂盒，其特征在于，包括核酸检测试纸和包含有如权利要求1-3任一项所述引物探针组合物的扩增试剂。

5.如权利要求4所述试剂盒，其特征在于，还包括等温扩增试剂；

6.如权利要求4所述试剂盒，其特征在于，所述核酸检测试...

【技术特征摘要】

1.一种引物探针组合物，其特征在于，应用于检测肿瘤耐药基因snp突变位点，包括：错配引物和反向探针；

2.如权利要求1所述引物探针组合物，其特征在于，所述错配引物的5’端标记有荧光素；

3.如权利要求1所述引物探针组合物，其特征在于，所述反向探针中标记有四氢呋喃，并且5’端标记有生物素，3’端标记有间臂基团；

4.一种试剂盒，其特征在于，包括核酸检测试纸和包含有如权利要求1-3任一项所述引物探针组合物的扩增试剂。

5.如权利要求4所述试剂盒，其特征在于，还包括...

【专利技术属性】
技术研发人员：王保曼，杨明妍，高方鸣，高楠，王鹏云，刘波涛，
申请(专利权)人：生工生物工程上海股份有限公司，
类型：发明
国别省市：