嗜水气单胞菌突变株及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种嗜水气单胞菌突变株及其制备方法和应用。嗜水气单胞菌突变株为flpL基因缺失的嗜水气单胞菌flpL突变菌，其保藏编号为CCTCC M 2024135。制备方法包括：提取嗜水气单胞菌全基因组；构建flpL基因敲除所使用的引物；以全基因组为模板，使用引物进行目的基因扩增和重叠延伸，得到flpL基因缺失片段；通过自杀质粒pRE112对嗜水气单胞菌的flpL基因进行框内缺失突变，得到重组质粒pRE112‑ΔflpL；将重组质粒转入WM3064感受态细胞，通过接合转移构建同源重组突变株。本发明专利技术提供的嗜水气单胞菌突变株能够制备嗜水气单胞菌的弱病毒活疫苗，预防水产养殖中的嗜水气单胞菌感染。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物，特别涉及一种嗜水气单胞菌突变株及其制备方法和应用。

技术介绍

1、嗜水气单胞菌属于气单胞菌科、气单胞菌属，是一种革兰氏阴性短杆菌，有运动力。在水生环境中广泛存在，是一种革兰氏阴性菌，菌体呈直杆状有鞭毛，能够活动，无芽孢，无荚膜，兼性厌氧。该菌适应能力强，温度耐受范围广，从4℃-40℃都能够存活，并且其ph耐受性也很强，在自然界中分布广泛。

2、越来越多的证据表明，嗜水气单胞菌可引起软体动物、鱼类、两栖类、爬行类、鸟类及哺乳类等多种动物的全身性败血症或局部感染，常致动物大量死亡。20世纪80年代末在中国、菲律宾、泰国、印度等传统池塘养殖大国的鱼类爆发性疾病中，该菌被认为是重要的病原。人类因嗜水气单胞菌感染所致急性胃肠炎、食物中毒、败血症及伤口感染亦时有报道。鱼类感染嗜水气单胞菌后，感染可导致鲤鱼出血病、黄颡鱼腹水病和鳖白点病等，会暴发细菌性疾病，造成巨大的经济损失，阻碍了水产养殖业的可持续发展。嗜水气单胞菌还可以感染人，可导致人体皮肤感染、肠道炎症甚至败血症等疾病。嗜水气单胞菌不仅给养殖业带来巨大的经济损失，也严重影响到环境本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种嗜水气单胞菌突变株，其特征在于，所述嗜水气单胞菌突变株为flpL基因缺失的且能稳定遗传的嗜水气单胞菌flpL突变菌，所述嗜水气单胞菌突变株的保藏编号为CCTCC M 2024135。

2.一种嗜水气单胞菌突变株的制备方法，其特征在于，包括以下具体步骤：

3.根据权利要求2所述嗜水气单胞菌突变株的制备方法，其特征在于，在S2中，所述引物包括flpL-a、flpL-b、flpL-c、flpL-d、flpL-F、flpL-R、pRE112-F和pRE112-R。

4.根据权利要求3所述嗜水气单胞菌突变株的制备方法，其特征在于，在S3中，具体包括：...

【技术特征摘要】

1.一种嗜水气单胞菌突变株，其特征在于，所述嗜水气单胞菌突变株为flpl基因缺失的且能稳定遗传的嗜水气单胞菌flpl突变菌，所述嗜水气单胞菌突变株的保藏编号为cctcc m 2024135。

2.一种嗜水气单胞菌突变株的制备方法，其特征在于，包括以下具体步骤：

3.根据权利要求2所述嗜水气单胞菌突变株的制备方法，其特征在于，在s2中，所述引物包括flpl-a、flpl-b、flpl-c、flpl-d、flpl-f、flpl-r、pre112-f和pre112-r。

4.根据权利要求3所述嗜...

【专利技术属性】
技术研发人员：于永耀，吴正犇，方礼豹，吴荣华，焦含阳，刘强，王凯，
申请(专利权)人：江门市澳保生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：